肝細胞増殖因子受容体(c-Met)を介するシグナル伝達の分子機構

肝细胞生长因子受体（c-Met）介导的信号转导分子机制

• 批准号: 07273108
• 负责人: 喜多村 直実
• 金额: $ 75.52万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07273108/
• 关键词: 肝細胞増殖因子(HGF); c-Met; がん細胞の増殖制御; MAPキナーゼ; Hrs結合蛋白質; SH3ドメイン; 脱ユビキチン化酵素; 肝細胞増殖因子; がん細胞の浸潤性; Ras蛋白質; 細胞増殖制御; HGF; c-Met受容体; ErbBリガンド; HEP受容体; スルホニール尿素受容体; インスリンシグナル伝達系; ErbB3; HB-EGF; ガストリン受容体; ソマトスタチン; GLUT4のトランスロケーション; Gas6; Sky; 細胞

肝細胞増殖因子(HGF)受容体(c-Met)遺伝子は種々のがんの発生に関わると考えられており、最近家族性腎がんの原因遺伝子として同定された。本研究ではc-Metを介する細胞内シグナル伝達機構について解析を行い以下の結果を得た。(1)HGFは正常肝細胞の増殖を促進するが、多くの肝がん由来細胞に対してはむしろ増殖を抑制する。そこでHGFに対してc-Metを介して増殖抑制応答を示す肝がん由来HepG2細胞を用いてシグナル伝達機構を解析した。HGF刺激したHepG2細胞ではMAPキナーゼの活性化が強く促進された。MAPキナーゼ・キナーゼ(MEK)に対する特異的阻害剤の効果を調べたところ、低いレベルのMAPキナーゼの活性化を示す低濃度の阻害剤処理により、HGF刺激に対する細胞増殖抑制応答が阻害され増殖が促進した。一方MAPキナーゼの活性化を完全に阻害する高濃度の阻害剤処理では増殖が抑制された。以上の結果より、HGF刺激による細胞増殖の制御にはMAPキナーゼ経路が重要な役割を果たしているが、この経路が強く活性化されると増殖が抑制されることが示唆された。(2)HrsはHGFで刺激された細胞においてc-Metを介して速やかにチロシンリン酸化される蛋白質である。またHrs結合蛋白質(Hbp)は、酵母two-hybrid法により単離された新しい蛋白質であり、構造内にSH3ドメインを持っている。このSH3ドメインに結合する蛋白質として脱ユビキチン化酵素UBPYが単離されている。そこでこのUBPYの機能を明らかにするために、HbpSH3ドメイン結合部位を欠損するUBPYを細胞に導入し解析した。その結果、結合部位を欠損するUBPYは増殖因子の細胞内分解を抑制することが明らかになった。したがってUBPYはHbpのSH3ドメインに結合し、増殖因子および受容体の分解経路に重要な役割を担っているものと考えられる。

Liver cells raised colonization factor (HGF) by the capacity of body (c - Met) heritage 伝 は kind son 々 の が ん の 発 raw に masato わ る と exam え ら れ て お り, recently familial renal が ん の reason but 伝 child と し て with fixed さ れ た. This study で は c - Met を interface す る intracellular シ グ ナ ル 伝 of institutions に つ い て parsing を line below い の result を た. (1) HGF は normal liver cells を の raised colonization promote す る が, multiple く の liver が ん origin cells に し seaborne て は む し ろ raised colonization を inhibit す る. そ こ で HGF に し seaborne て c - Met を interface し て raised colonization inhibit 応 answer を す in liver が ん origin HepG2 cells を using い て シ グ ナ ル 伝 of institutions を parsing し た. HGF stimulates the <s:1> たHepG2 cells で く MAPキナ ゼ ゼ <s:1> activation が and strongly く promotes された. MAP キ ナ ー ゼ · キ ナ ー ゼ (MEK) に す seaborne る specific resistance against tonic の unseen fruit を adjustable べ た と こ ろ, low い レ ベ ル の MAP キ ナ ー ゼ の activeness を す in low concentration の resistance against tonic 処 Richard に よ り, HGF stimulation に す seaborne る cells inhibit 応 answer が rights colonization resistance against さ れ raised colonization が promote し た. One side MAPキナ ゼ ゼ <s:1> activation を complete に inhibition する high-concentration <s:1> inhibition agent treatment で proliferation が inhibition された の above results よ り, HGF stimulation に よ る cells raised colonization の suppression に は MAP キ ナ ー ゼ 経 road が important な "を cut fruit た し て い る が, こ の 経 road strong が く activeness さ れ る と raised colonization が inhibit さ れ る こ と が in stopping さ れ た. (2) Hrs は HGF で stimulus さ れ た cells に お い て c - Met を interface し て speed や か に チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ る protein で あ る. ま た Hrs binding protein (Hbp) は, yeast two hybrid method に よ り 単 from さ れ た new し い protein で あ り, construct に SH3 ド メ イ ン を hold っ て い る. こ の SH3 ド メ イ ン に combining す る protein と し て ユ off ビ キ チ ン phenoloxidase UBPY が 単 from さ れ て い る. そ こ で こ の UBPY の function を Ming ら か に す る た め に, HbpSH3 ド メ イ ン combining site を owe loss す る UBPY を cells に import し parsing し た. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, binding site を deficiency するUBPY とが proliferative factor <e:1> intracellular decomposition を inhibition する とが とが Ming ら になった になった し た が っ て UBPY は Hbp の SH3 ド メ イ ン に し, raised colonization factor お よ び by decomposition 経 の way let body cut を bear important な に service っ て い る も の と exam え ら れ る.

项目成果

T. Shimomura: "Multiple sites of proteolytic cleavage to release soluble forms of hepatocyte growth factor activator inhibitor type 1 from a transmembrane form"J. Biochem.. 126. 821-828 (1999)

T. Shimomura：“多位点蛋白水解裂解从跨膜形式释放可溶形式的肝细胞生长因子激活剂抑制剂 1 型”J。

H.Yoshitomi: "Involvement of MAP kinase/c-fos signaling in the inhibition of cell growth by somatostatin in insulinoma-darived cell." Am.J.Physiol.(Endocrinol.Matab.). (in press). (1996)

H.Yoshitomi：“MAP 激酶/c-fos 信号传导参与生长抑素对胰岛素瘤来源细胞的细胞生长的抑制。”

H. Kataoka: "Conserved expression of hepatocyte growth factor activator inhibitor tye-2/placental bikunin in human colorectal carcinomas"Cancer Leyy,. 148. 127-134 (2000)

H. Kataoka：“肝细胞生长因子激活剂抑制剂 tye-2/胎盘 bikunin 在人结直肠癌中的保守表达”Cancer Leyy，。

H. Tanaka: "A Hrs binding protein having a Src homology 3 domain is involved in intracellular degradation of growth factors and their receptors"Genes to Cells. 5. 57-69 (2000)

H. Tanaka：“具有 Src 同源性 3 结构域的 Hrs 结合蛋白参与生长因子及其受体的细胞内降解”Genes to Cells。

M.Kaibori: "Hepatocyte growth factor stimulates synthesis of lipids and secretion of lipoproteins in rat hepatocytes." Hepatology. 27. 1354-1361 (1998)

M.Kaibori：“肝细胞生长因子刺激大鼠肝细胞中脂质的合成和脂蛋白的分泌。”