エンドソームにおけるユビキチン化蛋白質の選別機構とその制御

内体中泛素化蛋白的分选机制及其调控

• 批准号: 16657054
• 负责人: 喜多村 直実
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16657054/
• 关键词: エンドソーム; 受容体; ユビキチン化; 選別輸送; 脱ユビキチン化酵素 UBPY; Eps15; Hrs; STAM複合体; VHSドメイン; UIM

エンドソームはエンドサイトーシスされた細胞膜上の受容体のうち、リソソームに運ばれ分解される受容体と細胞膜にリサイクルされる受容体を選別するオルガネラである。この選別において受容体のユビキチン化が、その受容体がリソソームへ輸送されるための選別シグナルとして機能している。本研究ではエンドソームにおけるユビキチン化蛋白質の選別制御における脱ユビキチン化酵素UBPYの役割を解析し、以下の結果を得た。1.酵素活性を欠損したUBPYをHeLa細胞に過剰発現したところ、ユビキチン化蛋白質が初期エンドソームに蓄積した。またこの蓄積はsiRNAによりUBPYをknockdownした細胞においても観察された。さらにユビキチン化蛋白質が蓄積したエンドソームは異常な形態を示した。そこでこの形態について電子顕微鏡を用いて詳細に解析したところ、エンドソームの異常な形態はエンドソームが凝集することによって起ることが明らかになった。これらの結果は、UBPYはエンドソームにおいて蛋白質のユビキチン化レベルを調節し、それによりエンドソームの形態が維持されていることを示唆している。2.エンドソームにおける選別制御に関わる蛋白質のいくつかは自身がユビキチン化されることが知られている。そこでUBPYがこれらのユビキチン化の調節に関わっているかを解析した。酵素活性を欠損したUBPYを過剰発現した細胞およびUBPYをknockdownした細胞においてEps15蛋白質のユビキチン化レベルが上昇した。またこれらの細胞において、Eps15はエンドソームに蓄積してくることが観察された。これらの結果は、Eps15はUBPYの基質の1つであり、UBPYはそのユビキチン化レベルを調節することによりエンドソームにおける選別制御に関わっていることを示唆している。

The receptor on the cell membrane can be separated from the receptor on the cell membrane. The selection of the receiver is based on the selection of the receiver and the receiver is based on the selection of the receiver. In this study, we obtained the following results: 1. The enzyme activity is deficient in UBPY and the protein is accumulated in the early stage. The accumulation of siRNA in UBPY was detected by cell phone. The accumulation of protein in the brain is abnormal. The morphology of the electron microscope was analyzed in detail. The morphology of the electron microscope was analyzed in detail. As a result, UBPY has been able to regulate protein metabolism and maintain protein morphology. 2. The selection of protein is related to the selection of protein. UBPY is the most important factor in the development of the economy. The enzyme activity is deficient and the UBPY protein is knocked down. The cell is in the middle of the cell, Eps15 is in the middle of the cell, and the cell is in the middle of the cell. The results are as follows: Eps15: UBPY's base 1: UBPY: UBPY.

项目成果

Enhanced JNK activation by NESK without kinase activity upon caspase-mediated cleavage during apoptosis

• DOI: 10.1016/j.cellsig.2005.03.004
• 发表时间: 2005-11-01
• 期刊: CELLULAR SIGNALLING
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kakinuma, H;Inomata, H;Kitamura, N
• 通讯作者: Kitamura, N

Activation of c-Met (hepatocyte growth factor receptor) in human gastric cancer tissue

• DOI: 10.1111/j.1349-7006.2004.tb02185.x
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: CANCER SCIENCE
• 影响因子: 5.7
• 作者: Inoue, T;Kataoka, H;Miyazawa, K
• 通讯作者: Miyazawa, K

Regulation of EGF receptor downregulation by UBPY-mediated deubiquitination at endosomes

UBPY 介导的内体去泛素化调节 EGF 受体下调

• 发表时间: 2005
• 期刊: Mol.Biol.Cell 16
• 作者: Moriyama-Kita M;et al.;佐藤 博;E. Shirako;A. Kondo;E. Mizuno;M.Nakamura;E.Mizuno;M.Maemura;A.Yamasaki;M.Nakamura;M.Komada;H.Kakinuma;H.Tanaka;J.Han;E.Mizuno
• 通讯作者: E.Mizuno

Hepatocyte growth factor induces redistribution of p21CIP1 and p27KIP1 through ERK-dependent p16INK4a up-regulation, leading to cell cycle arrest at G1 in HepG2 hepatoma cells

• DOI: 10.1074/jbc.m503431200
• 发表时间: 2005-09-09
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Han, JH;Tsukada, Y;Tanaka, T
• 通讯作者: Tanaka, T

Involvement of down regulation of Cdk2 activity in hepatocyte growth factor-induced cell cycle arrest at G1 in the human hepatocellular carcinoma cell line HepG2

Cdk2活性下调参与肝细胞生长因子诱导的人肝癌细胞系HepG2细胞周期阻滞在G1期

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Biochem. 136
• 作者: Kano;F.;山内忍;村田昌之;Fumi Kano;Fumi Kano;Satomi Nadanaka;J.Ichinose;加納ふみ;加納ふみ;田中亜路;M.Nakamura;M.Komada;H.Kakinuma;H.Tanaka;J.Han;E.Mizuno;T.Hori;E.Mizuno;C.Morino;H.Itoh;T.Inoue;Y.Tsukada
• 通讯作者: Y.Tsukada