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がん細胞の分化・極性の制御と増殖因子受容体

癌细胞分化、极性和生长因子受体的调节

基本信息

批准号：
17014032
负责人：
喜多村直実
金额：
$ 18.82万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17014032/
关键词：
がん細胞の分化.極性増殖因子受容体 HGF受容体(c-Met)細胞周期 Cdkインヒビター増殖因子受容体のユビキチン化脱ユビキチン化酵素 UBPY EGF 受容体がん細胞の分化・極性シグナル伝達脱ユビキチン化酵素UBPY エンドソーム選別輸送

项目摘要

がん細胞の分化・極性の制御に関わる増殖因子受容体のシグナル伝達および細胞内局在について解析し、以下の結果を得た。1.がん細胞の分化制御の機構を理解するためには、G1期での細胞周期の停止のメカニズムを明らかにすることが重要である。 HGFはその受容体c-Metを介して肝がん由来細胞株HepG2に作用し、細胞周期をG1期で停止することにより増殖を抑制する。このG1期での細胞周期の停止にはCdkインヒビターp16の発現上昇が必要である。 P16の発現制御には転写因子Etsが重要であることから、本研究ではEtsの活性化を負に制御する因子であるId1の解析を行った。 HepG2細胞ではId1の発現が高い状態にあり、HGF刺激により発現が減少した。またId1の過剰発現によりHGF刺激によるp16の発現上昇が抑制された。さらにId1をノックダウンした細胞ではp16の発現上昇はみられなかったが、同時にEtsのリン酸化を促進するとp16の発現が上昇した。これらの結果から、HGF刺激によるp16の発現上昇にはId1の発現減少が必要であることが明らかになった。2.がん細胞における極性の変化と増殖因子受容体の局在は密接に関係し、その局在にはユビキチン化が重要である。本研究ではEGF受容体のユビキチン化レベルを抑制している脱ユビキチン化酵素UBPYについて活性調節機構を解析した。UBPYと共免疫沈降する蛋白質を探索したところ、14-3-3蛋白質が同定された。In vitroにおけるUBPYの脱ユビキチン化活性は、過剰の14-3-3を加えることにより抑制された。さらに14-3-3と結合できない変異型UBPYを過剰発現した細胞におけるEGF受容体のユビキチン化レベルが野生型UBPYに比べて減少した。これらの結果はUBPYの脱ユビキチン化酵素活性は14-3-3により抑制されていることを示している。

The following results were obtained from the analysis of cell differentiation, polarity regulation, proliferation factor receptor and intracellular regulation. 1. It is important to understand the mechanism of cell differentiation and control, and the mechanism of cell cycle arrest in G1 phase. HGF is a receptor for HepG2 and inhibits cell cycle progression through cell cycle arrest. The cell cycle stops in G1 phase and the p16 appears to rise. P16 activation control factor Ets is important. In this study, Ets activation control factor Id1 is analyzed. HepG2 cells showed a high level of Id1 expression and a decrease in HGF stimulation. The occurrence of Id1 was inhibited by HGF stimulation and the occurrence of p16 was increased. The expression of p16 increased in the cells with the increase of Id1, and the expression of p16 increased in the cells with the increase of Ets. HGF stimulation increases the occurrence of p16 and decreases the occurrence of Id1. 2. The polarity of the cell is changed, the receptor of the growth factor is closely related, and the receptor of the growth factor is changed. In this study, we analyzed the regulatory mechanism of EGF receptor activity. UBPY and co-immune sedimentation protein discovery, 14-3-3 protein identification In vitro, UBPY is active and inactive. In vitro, UBPY is active and inactive. In 14-3-3, the binding of heterotypic UBPY was reduced compared with wild-type UBPY in the presence of EGF receptor in cells. The results showed that the activity of UBPY was 14-3-3, and the activity of UBPY was 14-3.