新しい単球、マクロファージに発現する脂質受容体に関する分子生物学的研究

新单核细胞和巨噬细胞表达的脂质受体的分子生物学研究

• 批准号: 10877108
• 负责人: 小林 靖
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877108/
• 关键词: トリグリセライド; 高脂血症; アポリポ蛋白; マクロファージ; 動脈硬化; アポB受容体

高中性脂肪や食餌由来TGリッチリポ蛋白は心血管疾患の新しい危険要因である。本研究ではヒトマクロファージに発現する、apoB48を介する受容体の単離を行った。その結果、3744bpからなる全く新しい蛋白であることが明らかになった。この受容体はマクロファージや強制発現させたCHO細胞をin vitroで泡沫化させることが明らかになった。部分長cDNAを用い大腸菌蛋白発現系を用い、組み換えアポB受容体蛋白を作製した。これをウサギを用いて抗体を作製したところ10,000倍希釈でウエスタンブロッチングにてバンドが検出でき、非常に特異性の高い抗体を作製することができた。これを用いてヒト動脈硬化巣(冠動脈、腕頭動脈アテローマ)の泡沫細胞での発現を検討したが、本受容体が泡沫細胞ならびにマクロファージに特異的に強く発現していることが分かった。加えて他の部位(脾臓、胸腺、りんぱ節、骨髄など)での単球ならびにマクロファージでの発現を検討したところ強い発現を認めた。次にマウスcDNAを用い、クローニングを行ったところ、ヒトアポB受容体と相同性の高いクローンを単離した。更にゲムノDNAを用い、遺伝子構造を解析したところ、ヒト遺伝子とほぼ同様な構造をしていることがわかった。これらの結果は、進化上非常に保存されており、脂質代謝の重要な役割に関与していることを示唆するものと考える。

The origin of high neutral fat diet TG protein is the new risk factor of cardiovascular disease. This study was conducted to investigate the effects of apoB48 on the growth and differentiation of the receptor. 3744bp This receptor is stressed to develop CHO cells in vitro. Part of the long cDNA is used in E. coli protein production system, and the protein is used in the production of E. coli receptor protein. This is a 10,000-fold increase in the number of highly specific antibodies produced. This is the case with the development of foam cells in coronary artery sclerosis (coronary artery, brachial artery failure), and the development of foam cells in host cells. Add other parts of the body (spleen, thymus, kidney, bone) to the body, and the appearance of the body will be discussed. The second part of the article is about the use of cDNA and the identity of the receptor. In addition, DNA analysis and genetic analysis should be carried out in the same way as DNA analysis. The results are evolutionary, highly conserved, and important for lipid metabolism.

项目成果

Kitamura H,Kobayashi T at al: "Association of clinical manifestations with HLA-B alleles in Takayasu Arteritis" Int J Cardiol. 66supple. 121-127 (1998)

Kitamura H、Kobayashi T 等人：“高安动脉炎中 HLA-B 等位基因与临床表现的关联”Int J Cardiol。

Numano F, Kobayashi Y.: "Takayasu arteritis-beyond pulselessness"Internal Medicine. 38. 226-232 (1999)

Numano F，Kobayashi Y.：“高安动脉炎-超越无脉”内科。

Kimura A, Kobayashi Y et al: "MICA gene polymorphism in Takayasu's arteritis and Buerger Disease,"Int J Cardiol. 66. 107-113 (1999)

Kimura A、Kobayashi Y 等人：“高安动脉炎和布尔格病中的 MICA 基因多态性”，Int J Cardiol。

Brown ML, Ramprasad MP et al: "A New, Unique Macrophage Receptor for Apolipoprotein B48: Cloning Expression and Atherosclerosis"Science. (in press). (2000)

Brown ML、Ramprasad MP 等人：“载脂蛋白 B48 的新型、独特巨噬细胞受体：克隆表达和动脉粥样硬化”科学。

Gustavo M, Kobayashi Y et al: "A case report: A long-term patency of aorto-aortic graft bypass in a patient with Takayasu Arteritis"Internal Medicine. 37. 934-939 (1998)

Gustavo M、Kobayashi Y 等人：“病例报告：高安动脉炎患者主动脉-主动脉搭桥术的长期通畅”内科。