局所麻酔薬副作用の分子機構:運動蛋白質1分子レベルでの解明

局麻药副作用的分子机制：单个运动蛋白分子水平的阐明

• 批准号: 10877240
• 负责人: 真下 節
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10877240/
• 关键词: 局所麻酔薬; 軸索輸送; キネシン; 微小管; 運動再構成系; 1分子運動アッセイ; 滑り運動; 蛍光標識

局所麻酔薬には本来の神経遮断作用以外に様々な副作用が報告されているが、その作用機序はいずれも不明である。これら副作用には、ミオシン・キネシン・ダイニンといった細胞内運動蛋白質が共通して関わっている。したがって、局所麻酔薬がこれら運動蛋白質の運動能を直接阻害することを示し得たならば、種々の副作用の機序を一元的に解明できる可能性がある。本研究では局所麻酔薬による神経細胞の軸索輸送阻害作用に注目した。局所麻酔薬は神経細胞の早い軸索輸送を用量依存性・可逆的に抑制することが知られている。軸索輸送は、被輸送小胞に結合した運動蛋白質キネシンが、ATP加水分解のエネルギーを用いて微小管に沿って滑り運動することにより行われる。我々は、キネシン-微小管系のin vitro 運動再構成モデル(多分子系及び1分子系)を用い、局所麻酔薬がキネシン運動能に与える直接作用を検討した。1.In vitro motility assayの系にて、局所麻酔薬(テトラカイン・リドカイン)はある閾値をもって、キネシンに沿った微小管の滑り運動を可逆的に停止させた。リドカインの常時荷電型QX-314もリドカインと同様の作用を示したことから、この作用は局所麻酔薬の荷電型によるものと考えられた。2.1分子運動アッセイの系にて、局所麻酔薬テトラカインは個々のキネシン分子の運動(微小管上の滑走距離)を用量依存性に抑制した。3.キネシン ATPase活性は局所麻酔薬により影響を受けなかったことから、局所麻酔薬はキネシンの運動サイクルのうちATP加水分解以降の過程を阻害することが示された。本研究でキネシン運動能を抑制した局所麻酔薬濃度は、これまで神経細胞の軸索輸送を阻害すると報告されている濃度とよく一致した。したがって、局所麻酔薬による神経細胞の軸索輸送阻害作用は、キネシン運動能の直接阻害によるものであることが明らかとなった。

In addition to the blocking effect of the local drug, the side effect of the drug was reported that the mechanism of action was unknown. No side effects, no side effects. It is possible to directly block the number of drugs and side effects in the order of one yuan. The purpose of this study is to pay attention to the effect of prevention and treatment in this study. The local government is responsible for the early delivery of information on the reversible dose of inhibition. The cable is used to send, to be sent, and to be combined with the protein enzyme, the ATP and the water to decompose the protein. The micro-tube is used to run the slider along the slippery line. In our laboratory, the micro-piping system in vitro moves and then becomes the microtube (poly-molecular system and sub-subsystem). The kinetic energy of the micro-pipe system (poly-molecular system and sub-system) is directly affected by the kinetic energy and energy of the system. 1.In vitro motility assay is a kind of reversing device that can be used to make sure that the microtubule slides along the microtubule. This is the same as the general application of the charged QX-314 power supply system, which is the same as that used by the local government. 2.1 Molecular motion detection is a dose-dependent inhibition of molecular motion (slippage distance isolation on microtubule) in both local and local markets. 3. In order to reduce the process, the activity of ATPase in the office is affected, and the activity in the office is analyzed by adding water to reduce the process. The purpose of this study is to reduce the number of people in the local government, and to send information on the prevention and treatment of accidents. The local government, the local government, the police, the

项目成果

Yoshikazu Miyamoto et al.: "Direct Inhibition of Microtubule-based Kinesin Motility by Local Anesthetics"Biophysical Journal. 78・2. 940-949 (2000)

Yoshikazu Miyamoto 等人：“局部麻醉剂对基于微管的驱动蛋白运动的直接抑制”生物物理学杂志 78・2（2000）。

Yoshikazu Miyamoto et al.: "Direct inhibition of the microtubule-based Kinesin motility by local anesthetics"Anesthesiology. 89・3A. A1419 (1998)

Yoshikazu Miyamoto 等：“局部麻醉剂对基于微管的驱动蛋白运动的直接抑制”麻醉学 89・3A（1998）。

Miyamoto Y,Mashimo T,Iwano AH,et al.: "Direct inhibition of the microtubale-based kinesin motility by local anesthetics." Anesthesiology. 89・3A. A1418 (1998)

Miyamoto Y、Mashimo T、Iwano AH 等：“局部麻醉剂对微管驱动蛋白运动的直接抑制”89·3A（1998）。