アデノウィルスベクターをもちいた鼻粘膜へのサイトカイン遺伝子導入に関する研究

利用腺病毒载体将细胞因子基因导入鼻粘膜的研究

基本信息

  • 批准号:
    10877264
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.28万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1998
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1998 至 1999
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究は、遺伝子治療の基礎的実験として、マウスをもちいて種々のサイトカイン遺伝子を組み込んだアデノウィルスベクターを経鼻的に感染させ、生体内とくに鼻腔にこれら外来遺伝子を導入・発現させることを目的とした。平成11年度は、β-galをコードしているLacZ遺伝子を組み込んだアデノウィルスベクター(AdexlCAlacZ)をもちいて、種々の条件下に6週令のBALB/cマウスに点鼻投与し、遺伝子の導入・発現のための至適条件をもたらす投与方法を求める感染実験をおこなった。力価1X10^9PFUのAdexlCAlacZを10μl右鼻腔内に滴下し、鼻中隔粘膜をβ-galの基質であるX-galで染色したところ散在性に青色の発色をみとめ、鼻粘膜におけるLacZ遺伝子の導入および発現が確認できた。組織学的には、嗅部および呼吸部の上皮細胞および嗅神経に発現の分布が認められたが、嗅上皮の方が呼吸上皮よりも優位に発現していた。ベクターの量を5倍まで増加させたが、遺伝子の発現に有意の差は認められなかったため、より効率の高い投与方法を検討・評価中である。一方、サイトカイン遺伝子については、平成10年度に確立した遺伝子の組換え技術を基礎として、インターロイキン(IL)-6、IL-4、IL-12、IL-13、ガンマ・インターフェロンの各遺伝子を組み込んだアデノウィルスベクターの準備を完了した。したがって、ベクターの投与方法の至適条件が決定され次第、すぐにこれらのサイトカイン遺伝子の生体への遺伝子導入実験を開始できる状態に到達した。
This study aims to establish the basis for gene therapy, including gene therapy, gene therapy, and gene therapy. In 2011, the LacZ gene was selected from the group consisting of β-gal and AdexlCAlacZ. Under the condition of 6 weeks, the BALB/c gene was selected from the group consisting of AdexlCAlacZ and AdexlCAlacZ. Under the condition of 6 weeks, the LacZ gene was introduced and developed. 1X10^9PFU of AdexlCAlacZ was dripped into the right nasal cavity, the nasal septum mucosa, β-gal matrix, X-gal staining, scattered cyan color development, nasal mucosa, LacZ gene introduction and development were confirmed. Histologically, the distribution of epithelial cells and olfactory neurons in the olfactory and respiratory regions was recognized. The amount of bequests has increased by 5 times, the intentional differences in the discovery of genetic proteins have been recognized, and the high-efficiency investment methods have been discussed and evaluated. In addition, the preparation for the establishment of the foundation of the technology for the assembly of genetic components in the 10th year of Heisei, the preparation for the assembly of genetic components in the 10th year of Heisei was completed, including IL-6, IL-4, IL-12, IL-13, and IL-4. The optimal conditions for the selection and method of the vector are determined by the sequence and the state of the vector introduction process.

项目成果

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