DNAおよびヌクレオチド中の2-ヒドロキシアデニンの修復、浄化機構

DNA和核苷酸中2-羟基腺嘌呤的修复和纯化机制

• 批准号: 11138257
• 负责人: 葛西 宏
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138257/
• 关键词: 2-ヒドロキシアデニン; 2-ヒドロキシーdATP; MTH1蛋白質; ヌクレオチドプール浄化

2-ヒドロキシアデニンを含む二本鎖オリゴヌクレチドと培養細胞の抽出液をインキュベートした後、変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分析したが、2-ヒドロキシアデニンを含む鎖と相補鎖のいずれの場合にも、明瞭な切断断片は観察されなかった。2-ヒドロキシデオキシアデノシン5'-三リン酸(2-OH-dATP)、及び他の酸化的損傷デオキシヌクレオシド三リン酸である、8-ヒドロキシデオキシアデノシン 5'-三リン酸(8-OH-dATP)、8,5'-シクロデオキシアデノシン 5'-三リン酸、8-ヒドロキシデオキグアノシン 5'-三リン酸(8-OH-dFTP)、5-ヒドロキシデオキシシチジン 5'-三リン酸及び 5-フォルミルデオキシウリジン 5'-三リン酸を調整し、ヒトMTH1蛋白質または大腸菌MutT蛋白質とインキュベートしたところ、2-OH-dATP、8-OH-dATP、8-OH-dGTPの一リン酸体への加水分解が観察されたが、他の損傷ヌクレオチドの分解は検出されなかった。また、大腸菌MutT蛋白質を用いて同様の実験を行ったところ、8-OH-dGTP以外の酸化的損傷ヌクレオチドの分解は観察されなかった。2-OH-dATP、8-OH-dATP、8-OH-dGTPのMTH1蛋白質による分解反応の酵素学的パラメーターを算出したところ、8-OH-dATPの分解反応は親和性、最大反応速度ともに8-OH-dGTPの場合と同程度であり、8-OH-dATPは8-OH-dGTPと同程度に分解されることが明らかになった。一方、2-OH-dATPの分解反応を調べたところ、最大反応速度は8-OH-dGTPの場合と同程度であるが、親和性は約2倍であるために、2-OH-dATPは8-OH-dGTPよりも効率良く分解されることが判明した。

2-this is an ordinary university, which contains the extract of the cells of an ordinary university. After that, the electrophoretic analysis is performed. After that, the electrophoretic analysis is performed. The temperature is not changed. 2-maleic acid (2-OH-dATP), 8-maleic acid (8-OH-dATP), 5-trisaphosphoric acid (TBA), 5-tryptadecanoic acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trinodium acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trisarboxylic acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trinodium acid (TCA), 5-trisarboxylic acid (TCA), 5-trinuclear acid (TCA), 5-trinosine-trisinic acid (T 8-trimethoprim acid (8-OH-dFTP), 5-trimethoprim acid (8-OH-dFTP), 5-tryptopenic acid (MutT), 5-tryptopenic acid (MutT), 5-tryptopenic acid (TPA), 5-tryptopenic acid (TPA), 5-trinodium acid (TPA), 5-trinodium acid (TPA), 5-trisodium acid (TPA), 5-trinodium acid (TPA), 5-tryptopenic acid (TCA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-tryptopenic acid (TPA), 5-trisaphosphoric acid (TCA), 5-trinitrate acid (TPA), 5-trinosine acid, 5-trinosine acid, 5-trinosine, 5-trin 8-OH-dGTP, acid, acid, water, water, acid, acid, The MutT protein of Fungi and Magnoliae was used to observe the decomposition of the acidified bacteria other than 8-OH-dGTP. 2-OH-dATP, 8-OH-dATP, 8-OH-dGTP, MTH1 protein, enzyme reverse decomposition, enzymatic decomposition, 8-OH-dATP decomposition, maximum speed, 8-OH-dGTP, 8-OH-dATP, 8-OH-dGTP, and so on. On the one hand, the 2-OH-dATP decomposes and reacts, the maximum speed is 8-OH-dGTP, the maximum speed is about the same degree, and the harmony is about twice as high. The 2-OH-dATP is 8-OH-dGTP. The rate of good decomposition is low.

项目成果

Murata-Kamiya,N.,et al.: "Deficient uncleotide excision repair increases base-pair substitutions but decreases TGGC frameshifts induced by methylglyoxal in Escherichia coli"Mutation Res.. 442. 19-28 (1999)

Murata-Kamiya,N.,et al.：“缺陷性叔核苷酸切除修复增加了碱基对替换，但减少了大肠杆菌中甲基乙二醛诱导的 TGGC 移码”Mutation Res.. 442. 19-28 (1999)

Murata-Kamiya,N.,et al.: "Formation of 5-formyl-2'-dexycytidine in duplex DNA by Fenton-type reactions and γ-irradiation"Nucleic acids Res.. 27. 4385-4390 (1999)

Murata-Kamiya, N. 等人：“通过 Fenton 型反应和 γ 辐射在双链 DNA 中形成 5-甲酰基-2-右胞苷”《核酸研究》27. 4385-4390 (1999)

Kamiya,H.,et al.: "Preparation of 8-hydroxy-dGTP and 2-hydroxy-dATP by a phoshate transferreaction by nucleoside-diphosphate kinase"Nucleosides&Nucleotides. 18. 307-310 (1999)

Kamiya,H.,et al.：“通过核苷二磷酸激酶的磷酸转移反应制备 8-羟基-dGTP 和 2-羟基-dATP”

Nomoto,M.,et al.: "Analysis of 8-hydrooxyguanine in rat kidney ganomic DNA after administration of renal carcinogen,ferric nitriloacetate"Carcinogenesis. 20. 837-841 (1999)

Nomoto, M., et al.：“施用肾致癌物质次氮基乙酸铁后大鼠肾基因组 DNA 中 8-羟基鸟嘌呤的分析”致癌作用。