酸化的DNA損傷、8-ヒドロキシグアニンに関する生化学的および臨床医学的研究

DNA氧化损伤8-羟基鸟嘌呤的生化及临床医学研究

• 批准号: 02F00768
• 负责人: 葛西 宏
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02F00768/
• 关键词: 8-OH-dG; 酸化的DNA損傷; 代謝率; ヒト尿

先に報告した陰イオン交換カラム及び逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー・電気化学検出器(HPLC-ECD)による尿中8-ヒドロキシデオキシグアノシン(8-OH-dG)測定法の改良を行った。これまでの分析法では尿サンプルを2本準備し、一方はHPLC-ECDによる8-OH-dGの分析、もう一方は濃度補正物質クレアチニン(Cre)の分析を行い両者から8-OH-dG/Creを算出し酸化ストレス評価に用いた。今回は現HPLC-ECD法によりRNAの分解物であり代謝率に関係すると言われているメチル化グアニン(G*を同時に分析することに成功した。8-OH-dG/Cre値をヒト、ラット、マウス間で比較すると差はみられなかったが上記方法により8-OH-dG/G*を算出するとヒトはラット、マウスに比べ3倍高かった。また高脂肪および赤身肉は大腸癌を引き起こす事が報告されていることから、高脂肪、赤身肉のモデル餌を作りラットの酸化的DNA損傷との影響を調べた。このモデル餌を3週間ラットへ投与後24時間尿を採取し8-OH-dGを測定したところ予想に反しこのモデル餌投与群ではコントロール群に比べ有意に尿中8-OH-dG/Cre値が低かった。このモデル餌は何らかのメカニズムにより活性酸素を消去する作用があると思われる。

に report first し た Yin イ オ ン exchange カ ラ ム and び anti-phase カ ラ ム を with い た high-speed liquid ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー, electric chemical 検 気 extractor (HPLC - ECD) に よ る urine 8 - ヒ ド ロ キ シ デ オ キ シ グ ア ノ シ ン (8 - OH - dG) measurement の improved line を っ た. こ れ ま で の analysis で は urine サ ン プ ル を 2 this preparation し, one party は HPLC - ECD に よ る 8 - OH - dG の analysis, も う side は package material concentration of ク レ ア チ ニ ン line (Cre) の analysis を い struck the か ら 8 - OH - dG/Cre を calculate し acidification ス ト レ ス review 価 に with い た. Today back to は HPLC ECD method now に よ り RNA の decomposition で あ り metabolic rate に masato is す る と said わ れ て い る メ チ ル change グ ア ニ ン (G * を に analysis at the same time す る こ と に success し た. 8 - OH - dG/nt Cre を ヒ ト, ラ ッ ト, マ ウ ス comparison で す る と poor は み ら れ な か っ た が written method に よ り 8 - OH - dG/G * を calculate す る と ヒ ト は ラ ッ ト, マ ウ ス に 3 times higher than べ か っ た. ま た high-fat お よ び naked flesh は colorectal cancer を lead き up こ す matter が report さ れ て い る こ と か ら, high-fat, naked flesh の モ デ ル を as bait り ラ ッ ト の acidification of DNA damage と の influence を adjustable べ た. こ の モ デ ル を bait 3 weeks between ラ ッ ト へ cast with urine を take 24 time after 8 - OH - determination of dG を し し た と こ ろ to think に anti し こ の モ デ ル cast bait and group of で は コ ン ト ロ ー に ル group than べ intentionally に urine 8 - OH - dG/nt Cre が low か っ た. <s:1> モデ モデ ら bait われる he ら を <s:1> メカニズムによ を を active acid を elimination する effect があると thought われる.

项目成果

Peter Svoboda: "Simultaneous analysis of 8-OH-dG and methylated guanine in urine from human and rodent."Free Radical Biology and Medicine. 12. (2004)

Peter Svoboda：“同时分析人类和啮齿动物尿液中的 8-OH-dG 和甲基化鸟嘌呤。”自由基生物学和医学。

Peter Svoboda, Kasai, H., et al.: "Analysis of urinary 8-hydroxydeoxyduanosine in human, mouse or rat and effect of high fat and meat model diet."Cancer Science. 94. 471 (2003)

Peter Svoboda、Kasai, H. 等人：“人、小鼠或大鼠尿 8-羟基脱氧双肌苷的分析以及高脂肪和肉类模型饮食的影响。”癌症科学。