活性酸素により生じるDNA損傷の同定と突然変異の機構

活性氧引起的DNA损伤鉴定及突变机制

• 批准号: 06280238
• 负责人: 葛西 宏
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06280238/
• 关键词: 2-ヒドロキシアデニン; グリオキサール; 活性酸素; 突然変異

デオキシアデノシン(dA)及びトリリン酸体(dATP)、一本鎖又は二本鎖DNAを活性酸素発生系[Fe(II)-EDTA]で処理し、HPLCで解析した。その結果、アデニン塩基の2位が水酸化され、2-ヒドロキシアデニン(2-OH-Ade)が生成することを見い出した。2-OH-Adeの収量を8-ヒドロキシグアニン(8-OH-Gua)と比較したところ、dAやdATPを処理した場合には、8-OH-Guaの3〜6分の1、DNAを処理した場合には、8-OH-Guaの約40分の1であった。次に、dATPから生ずる2-OH-dATPがDNAポリメラーゼ(クレノ-断片及びDNAポリメラーゼα)の基質となって、DNA鎖中に取り込まれるか否かを調べた。その結果、クレノ-断片は鋳型DNA中のT残基に対して、ポリメラーゼαは鋳型DNA中のTとCに対して、2-OH-dATPを取り込むことを明らかにした。一方、鋳型DNA中の2-OH-Adeに対して、DNAポリメラーゼがどのヌクレオチドを取り込むかを調べたところ、dTMPの他にdAMPも取り込むことを新たに見い出した。この事実は、2-OH-Adeの生成が活性酸素によって生ずる、A→T変異の原因の一つである可能性を示唆するものである。また、DNAをFe(II)-EDTAで処理し、HPLCで解析した結果、鎖の一部が切断され、グリオキサールが生じることを新たに見い出した。グリオキサールの生成量は、同一条件下で生じる8-OH-Guaの約20倍であった。この化合物は、ヌクレオチドやヌクレオシドのFe(II)-EDTA処理によっても生成した。フリオキサールは、Ames試験陽性の化合物であり、DNAからのグリオキサールの生成も又、活性酸素による突然変異・発がんの原因の一つである可能性がある。

Decontaminants (dA) and dATP, DNA and other active acid peptides [Fe(II)-EDTA] were processed and analyzed by HPLC. The result of その, アデニン塩塩の2-position がwater acidified され, 2-ヒドロキシアデニン(2-OH-Ade)がgenerated することを见い出した. 2-OH-Ade's yield and comparison of 8-Hydrolysis and dATP processing Occasion には, 8-OH-Gua の 3~6 minutes の1, DNA を treatment した occassion には, 8-OH-Gua の 1 about 40 minutes であった. Second, dATPから生ずる2-OH-dATPがDNAポリメラーゼ(クレノ-fragment andびDNAポリメラーゼα)の matrix となって, DNA lock in the り込まれるかNo かを Adjustment べた.そのRESULT, クレノ-fragmented は鋳 type, のT residue in DNA, に対して, ポリメラーゼα 鋳 typeのTとCに対して in DNA, 2-OH-dATP をtake り込むことを明らかにした. One side, 2-OH-Ade に対して in the 鋳 type DNA, DNAポリメラーゼがどのヌクレオチドべたところ, dTMPのhis dAMPもtake り込むことを新たに见い出した.この事実は, 2-OH-Ade's generated active acid によって生ずる, A→T 変different reason の一つであるpossibility をshows するものである.また, DNAをFe(II)-EDTAでprocessingし, HPLCでanalysisしたresults, lockのpartがcuttingされ,グリオキサールが生じることを新たに见い出した. The amount of グリオキサールの produced is about 20 times that of でじる8-OH-Guaの under the same conditions.このCompound は, ヌクレオチドやヌクレオシドのFe(II)-EDTA treatment によっても generates した.フリオキサールは, Ames test positive compound であり, DNA からのグリオキサールのGeneration もも, Activated acid による Sudden change・発がんのCause の一つであるPossibility がある.