IkBキナーゼ活性化のメカニズムの解析

IkB激酶激活机制分析

• 批准号: 11139263
• 负责人: 中野 裕康
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11139263/
• 关键词: NF-kB; Tax; IkB kinase; TRAF; TNF; NSI; アポトーシス; ノックアウトマウス

1. HTLV-1のコードするTaxを介するNF-kB活性化のメカニズムを検討した結果、TaxはIkB kinase(IKK) 複合体の構成成分であり、それ自身キナーゼ活性を有するIKKαやIKKβとは直接会合せずに、アダプター分子であるIKKγと直接会合して、IKK複合体を活性化していることが明らかとなった。さらに種々のTax変異体を用いた結果、IKKγの会合とNF-kB活性化能は相関していることが明らかとなった。現在TaxがどのようなメカニズムでIKKのキナーゼを活性化しているかを検討中である。2. ヒトパルボウイルスB19の非構造タンパクであるNS1がIKKβを活性化してNF-kBの活性化をもたらしていることを明らかにした。その活性化にはNS1の中心領域に存在する約300個のアミノ酸が必要であることが明らかとなった。さらにレポーターアッセイを用いた解析から、NS1を同時に発現させることにより、NS1がTNFによるNF-kBの活性化をsynergistic に増強することが明らかとなった。3. TNFを介するNF-kBの活性化のメカニズムを明らかにするために、TNFレセプタースーパーファミリーを介するNF-kBの活性化に関与するシグナル伝達分子であるTNF receptor-associated factor 2 (TRAF2) およびTRAF5のダブルノックアウトマウス(DKO)を作製した。DKOよりembryonic fibroblast (EF) を作製し、TNFによるNF-kBの活性化あるいはアポトーシスに対する感受性について検討した。TNFを介するNF-kBの活性化はTRAF2あるいはTRAF5のシングルノックアウトマウス由来のEFでは野性型と同程度に認められるにもかかわらず、ダブルノックアウトマウス由来のEFでは著明に減弱していた。さらにTNF単独処理によりDKO由来のEFには著明なアポトーシスが誘導されることが明らかとなった。これらの解析から、TNFレセプターを介するNF-kBの活性化はTRAF2とTRAF5によって担われている事が明らかとなった。

1. HTLV-1 and Tax are involved in the activation of NF-kB. As a result, Tax and IkB kinase(IKK) complexes are composed of IKKα, IKKβ and IKK γ. The results show that IKKγ converges with NF-kB activation energy. Now Tax is activated. 2. NS1 and IKKβ are activated in the presence of NF-kB. About 300 active substances exist in the central domain of NS1. NF-kB activation synergistically enhanced by NS1 3. TNF receptor-associated factor 2 (TRAF2) and TNF receptor-associated factor 5 (DKO) are involved in the activation of NF-kB. DKO is an embryonic fibroblast (EF) inhibitor, TNF is an NF-kB activator, and the sensitivity of DKO is an indicator. The activation of NF-κ B in TNF-α medium is similar to that of EF in TRAF5. In addition to the above, we also discussed the relationship between the two countries. The activation of NF-kB in the analysis of TNF and TRAF5

项目成果

Akiba, H. , et al.: "CD28-independent costimulation of T cells by OX40 ligand and CD70 on activated B cells"J. Immunol. 162. 7058-7066 (1999)

Akiba, H. 等人：“OX40 配体和 CD70 对活化 B 细胞进行不依赖于 CD28 的 T 细胞共刺激”J.

Nakano H.et al.: "Targeted disruption of Traf5 gene causes defects in CD40,-and CD27-mediated lymphocyte activation"Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 96. 9803-9808 (1999)

Nakano H.等人：“Traf5 基因的靶向破坏导致 CD40 和 CD27 介导的淋巴细胞激活缺陷”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 96. 9803-9808 (1999)

Morio, T. et al.: "Ku in the cytoplasm associates with CD40 in human B cells and translocates into the nucleus following incubation with IL-4 and anti-CD40 mAb."Immunity. 11. 339-348 (1999)

Morio, T. 等人：“细胞质中的 Ku 与人 B 细胞中的 CD40 结合，并在与 IL-4 和抗 CD40 mAb 孵育后易位到细胞核中。”免疫。

Jin, D. -Y. , et al.: "Role of Adapter Function in Oncoprotein-mediated Activation of NF-Kb. HUMAN T-CELL LEUKEMIA VIRUS TYPE I Tax INTERACTS DERECTLY WITH IkB KINASEγ"J. Biol. Chem.. 274. 17402-17405 (1999)

Jin, D. -Y. 等人：“适配器功能在癌蛋白介导的 NF-Kb 激活中的作用。I 型 T 细胞白血病病毒与 IkB 激酶γ 直接相互作用”J Biol。 .17402-17405 (1999)

Yamazaki, T. , et al.: "CAST, a novel CD3ε-binding protein transducing activation signal for interleukin-2 production in T cells"J. Biol. Chem.. 274. 1873-1880 (1999)

Yamazaki, T., et al.：“CAST，一种新型 CD3ε 结合蛋白转导 T 细胞中白细胞介素 2 产生的激活信号”J. Biol. 274. 1873-1880 (1999)