担癌状態におけるTGFβを介した免疫抑制作用の基礎的研究

TGFβ介导的荷瘤状态免疫抑制作用的基础研究

• 批准号: 11140266
• 负责人: 林 秀敏
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11140266/
• 关键词: TGFβ; BMP; Smad; リン酸化; プロテアソーム

本年度は,主に,腫瘍細胞のTGFβの感受性の変化との関連性を探るために,TGFβやBMPによって,誘導され,それぞれの受容体に結合し,本来の気質の接近を阻害しているSmad7とよばれるタンパクを中心に解析した.Smad7を恒常的に活性化しているTGFβあるいはBMPの受容体(TβRI(TD),ALK2(QD))とともにCOS-1細胞に過剰発現させ,H_3^<32>PO_4によるリン酸化ラベルを行ったところ,リガンド刺激依存的なリン酸化が確認された.さらに,リン酸化アミノ酸の解析を薄層電気泳動で,リン酸化部位の同定をTOF-MSを用いて行った結果,TGFβ,BMP依存的なSmad7のリン酸化は,主にMH2領域に存在するSer残基であることが明らかとなった.また,そのSerをAlaにかえるとSmad7のTGFβシグナルの抑制作用が減弱し,このリン酸化は,Smad7の活性に重要であることが示唆された.また,ヒトSmad7のプロモーター領域をヒトgenomic libraryよりクローニングし,pGL3-basicに組込み、レポーター遺伝子を作成後,解析を行った.TGFβ及びBMP、いずれによる転写活性化も観察され,さらに種々の欠失変異を作成し,TGFβ及びBMP応答領域をほぼ同定した.Smad7の安定性についても検討した結果,リガンドの刺激に依存せず,おそらくユビキチン化によりプロテアソームにより分解されることを明らかにした.一方、TGFβを介した免疫抑制の作用機序も進めているが,IFN-γシグナルへのTGFβ,あるいはその下流のsmadタンパクの影響をGAS依存的,あるいはIRF-1依存的なレポーター遺伝子を用いて,種々の細胞で検討したところ,全く影響が見られず,また,Smad2や-3,-4とIRF1,Statlなどとの結合も見られなかった.

This year, the host, the host, the cell, the TGF β, the receptor, the receptor ALK2 (QD)) check out the COS-1 filter, H3 ^ & lt 32 GTX POLY4 acidizing agents confirm acidizing activity by stimulating dependent acidizing. The results of thin-film electrophoretic electrophoresis, the determination of acidified sites and the determination of TOF-MS, TGF β, BMP-dependent Smad7 acid acidification, and the presence of trace Ser residues in the primary MH2 domain. Ser, Ala, Smad7, TGF β, inhibition, acidification, Smad7 activity, activity. After the completion of the Smad7 system, the pGL3-basic system, the BMP, the BMP, the database, the TGF β, the TGF β and the Smad7 stability test, the results were analyzed, and the results were analyzed. I don't know. I don't know. I don't know. On the one hand, the immune suppression mechanism of TGF β is in progress, IFN- γ is sensitive to TGF β, smad is sensitive to GAS, and the IRF-1 is dependent on IRF-1. This is not the only way to improve the immune response of your child. The combination of the Statl information system and the information system can be used to improve the performance of the system.

项目成果

Hiroaki Kimura, et al.: "Molecular analysis of constitutive IL-1α gene expression in human melanoma cells : Autocrine stimulation through NF-κB activation by endogenous IL-1α"CYTOKINE. 10(11). 872-879 (1998)

Hiroaki Kimura 等人：“人黑色素瘤细胞中组成型 IL-1α 基因表达的分子分析：内源性 IL-1α 通过 NF-κB 激活进行自分泌刺激”CYTOKINE 10(11)。

Saotomo Itoh, et al: "Antiproliferative effect of IL-1 is mediated by p38MAP kinase in human melanoma cell A375"Journal of Immunlogy. 162(12). 7434-7440 (1999)

Saotomo Itoh 等人：“IL-1 的抗增殖作用是由人黑色素瘤细胞 A375 中的 p38MAP 激酶介导的”免疫学杂志。