インターロイキン1の細胞増殖阻害作用に対する耐性獲得機構の解析

IL-1细胞增殖抑制作用获得抵抗的机制分析

• 批准号: 06772144
• 负责人: 林 秀敏
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772144/
• 关键词: インターロイキン1; インターロイキン6; メラノーマ; 増殖阻害; インターロイキン6レセプター; gp130

IL-1感受性ヒトメラノーマ細胞株(A375-6)を長期培養することにより、IL-1に対して抵抗性を獲得したクローン(A375-R8,A375-R19)は構成的にIL-1αを産生し、これがオートクラインに作用しIL-6の産生も恒常的におこっていることがわかった。そこで、耐性化の獲得機構を解析するために、まず、このIL-1αの産生がIL-1に対する耐性化の引き金になっているか否かを検討した。感受性株(A375-6)ヒトIL-1α cDNAを導入し、強制発現させることにより、IL-1αやIL-6に対し抵抗性を獲得できるか、また、構成的に発現している耐性クローンからのIL-1αをIL-1αアンチセンスcDNAを高発現させ、抑制させることにより、IL-1αやIL-6に対して感受性を回復できるかどうかを検討した。しかしながら、いずれの場合も、IL-1α,IL-6ならびにTNF等に対する感受性には全く変化がみられず、IL-1産生は直接のIL-1耐性化の原因とはならないと考えられた。IL-1による細胞増殖阻害作用の機序の一つにIL-1によって誘導されるIL-6があると報告している。この耐性クローンはIL-6に対しても耐性を示すことから、次に、IL-6によるシグナル系の変化の有無について検討した。IL-6のレセプターは狭義のIL-6レセプター(IL-6R)とそのトランスデューサーであるgp130からなることが知られている。そこで、まず、これらのmRNAレベルでの発現をRT-PCR法を用いて調べたところ、gp130は両耐性クローンとも感受性株と同程度の発現が見らたが、IL-6RはA375-R8は強い発現が見られたが、A375-R19はほとんど検出されなかった。同じgp130をトランスデューサーとするoncostatin M に対する感受性は両耐性クローンにも見られたことから、gp130を介するシグナル伝達系は正常に機能していることが示唆された。また、IL-6刺激により、細胞内のp160のタンパクのチロシンリン酸化が誘導されることが報告されていることから、この点についても検討したところ、感受性株、A375-R8ではこのリン酸化が観察されたが、A375-R19では全く見られなかった。以上のことから、IL-6Rの欠損、あるいは、IL-6Rのシグナルは正常であるが、増殖阻害系のシグナルが欠損しているか、増殖阻害を抑制させる機構が誘導されているためにIL-6に対する感受性が見られないものと思われる。

IL-1-sensitive cell line (A375-6) was cultured for a long time, IL-1-resistant cell line (A375-R8,A375-R19) was obtained, and IL-1α was produced. To analyze the mechanism of tolerance, IL-1α production and tolerance The susceptible strain (A375-6) expressed IL-1α cDNA in response to induction, stress development, and acquisition of resistance, IL-1α, and IL-6, and expressed IL-1 α cDNA in response to induction, stress development, and component development. In addition, IL-1α,IL-6, TNF, etc. are directly related to IL-1 tolerance. The mechanism of proliferation inhibition induced by IL-1 is reported. The resistance of IL-6 to this disease is demonstrated by the presence or absence of changes in IL-6 resistance. The IL-6 is the only IL-6R that has the same meaning as the IL-6. The expression of IL-6R mRNA in A375-R8 and A375-R19 was detected by RT-PCR. The expression of IL-6R mRNA in A375-R8 was detected by RT-PCR. The sensitivity to oncostatin M associated with the gp130 is no longer seen in remote applications, and the Shilugel communication system associated with the gp130 is no longer functioning normally. IL-6 stimulation, intracellular p160-induced acidification, sensitive strain, A375-R8-induced acidification, A375-R19-induced acidification The mechanism of IL-6R deficiency, IL-6R deficiency, IL

项目成果

Tomomi Miyamoto et al.: "Novel growth promoting activity with a wide target cell spectrum is present in extracts of various cell types." Biochemistry and Molecular Biology International. 32. 973-981 (1994)

Tomomi Miyamoto 等人：“各种细胞类型的提取物中都存在具有广泛靶细胞谱的新型生长促进活性。”

Akihiko Takeuchi et al.: "Purification and characterization of a human erythrocyte-derivad growth factor with a wide target cell spectrum." Journal of Biological Chemistry. 269. 24935-24940 (1994)

Akihiko Takeuchi 等人：“具有广泛靶细胞谱的人红细胞衍生生长因子的纯化和表征。”

Akihiko Takeuchi et al.: "A potent human erythrocyte-derived growth promoting factor with a wide target cell spectrum : identification as catalase." Cancer Research. (in press). (1995)

Akihiko Takeuchi 等人：“一种有效的人红细胞衍生生长促进因子，具有广泛的靶细胞谱：鉴定为过氧化氢酶。”

Makoto Araki et al.: "Resistance to the anti-proliferative effct of IL-1 on human melanoma cell line is associated with endogenous production of IL-1 and IL-6." International Journal of Cancer. 56. 275-280 (1994)

Makoto Araki 等人：“人类黑色素瘤细胞系对 IL-1 抗增殖作用的抵抗与 IL-1 和 IL-6 的内源性产生有关。”

Takemasa Takii et al.: "Interleukin-1 down regulates type I interleukin 1 receptor mRNA expression in a human fibroblast cell line TIG-1 in the absence of prostaglandin E2 synthesis." Lymphokine and Cytokine Research. 13. 213-219 (1994)

Takemasa Takii 等人：“在没有前列腺素 E2 合成的情况下，Interleukin-1 下调人成纤维细胞系 TIG-1 中 I 型白细胞介素 1 受体 mRNA 的表达。”