SERAを発現する組み換えBCGワクチンの作製及び防御効果の検討

表达SERA的重组卡介苗疫苗的制备及保护效果检测

• 批准号: 11147223
• 负责人: 山田 毅
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11147223/
• 关键词: Recombinant BCG; malaria vaccine

(研究の目的)マラリアのワクチン抗原として様々な分子が同定され、ワクチン開発がなされている。その抗原の効果を引き出すのにアジュバントが必要であるが、ヒトに応用可能なアジュバントはまだ十分に開発されていない。結核の予防ワクチンBCG菌はヒトに使用できるアジュバントの中で最大の活性をもし安全性も高い。我々は、抗酸菌の分泌蛋白質α抗原をキャリアーとして外来蛋白質をBCGから分泌させるシステムを作製した。このシステムを用いてネズミマラリアの系で赤内型マラリア原虫の感染防御に成功した。このシステムをヒトに応用するため、ヒト型のP.falciparumの防御抗原SERAをBCG菌から大量に発現分泌させることを試みた。(今年度の成果及び考察)1.これまでにP.falciparumの防御抗原SERA(SE47')をコードする合成遺伝子全体とN末端部(SE47'-N),C末端部(SE47'-C)に二分割した断片をそれぞれα抗原遺伝子内に挿入し、組み換えBCGを作製した。それらを培養後、培養上清中の蛋白質にSE47'が分泌されていることを確認した。その結果、培養上清中に、SE47'の存在を確認することができた。2.次ぎに、SE47'の発現が確認された組み換えBCGをマウスに免疫し、抗体産生誘導能について検討した。マウスは6週令のBALB/c,♀を用いた。組み換えBCGをマウスの皮下に3回接種し、最終免疫後10日目に抗血清を採取した。そして抗SE47'抗体価をABC-ELISA法で測定したところ、400倍希釈で抗SE47'抗体の産生が認められた。

(Objective of the study) To identify and identify the molecular markers and markers of HRP. It is necessary for the antigen to be introduced into the system, and it is possible for the antigen to be introduced into the system. The maximum activity and safety of anti-tuberculosis BCG bacteria are high in the use of anti-tuberculosis drugs. BCG secretes protein alpha antigen, which is secreted by acid-resistant bacteria. The infection defense of the red parasite was successful. The defense antigen SERA of P. falciparum was secreted by BCG bacteria in large quantities. 1. The synthesis of the whole sequence of P. falciparum SERA(SE 47') and its N-terminal (SE 47'-N) and C-terminal (SE 47'-C) fragments was carried out in the α-antigen sequence. After culture, protein in culture supernatant was secreted and confirmed. Results, culture supernatant, SE47 'existence confirmed 2. The discovery of SE47 'was confirmed by the study of BCG immunity and antibody production induction. 6 weeks ago, I was in the middle of a fight. The antiserum was taken 10 days after the final immunization. The production of anti-SE47 antibody was detected by ABC-ELISA at 400 fold.

项目成果

Matsumoto,S.,: "Recombinant BCG secreting MSP1 induces protection against rodent malaria parasite infection depending on MSP-1-stimulated interferon-γ and parasite-specific antibodies"J.Exp.Med.. 188. 845-854 (1996)

Matsumoto, S.,：“分泌 MSP1 的重组卡介苗可根据 MSP-1 刺激的干扰素 γ 和寄生虫特异性抗体诱导针对啮齿动物疟疾寄生虫感染的保护”J.Exp.Med.. 188. 845-854 (1996)

Matsumoto,S.,: "Long-lasting protective immunity against rodent malaria parasite infection at the blood stage by recombinant BCG secreting msp1"Vaccine. 18. 832-834 (2000)

Matsumoto,S.，：“通过分泌 msp1 的重组卡介苗，在血液阶段对啮齿动物疟原虫感染产生持久的保护性免疫力”疫苗。