マラリアのワクチン開発を目指した,BCGからのSERA抗原発現の試み

尝试从卡介苗中表达 SERA 抗原，旨在开发疟疾疫苗

• 批准号: 10166218
• 负责人: 山田 毅
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10166218/
• 关键词: マラリア; ワクチン; 組み換えBCG

マラリアワクチン開発で,最も障害となっているのがアジュバントの問題である.動物実験等で,防御効果が確認されている抗原を,実際にヒトに投与するには,安全性と有効性を兼ね備えたアジュバントが必要であるが,未だ十分なものが無い.我々は熱帯医学研究所神原廣二教授との共同研究で,組み換えBCGのシステムを用いて,マウスを用いた赤内型マラリア原虫感染防御に成功し,その防御機構が,細胞性免疫をベースにした防御抗体産生誘導であることを,数年にわたる解析の結果,明らかにし,本年発表した(J.Exp.Med.,1998).さらに,BCGシステムを,ヒトに応用するため,熱帯熱マラリアの防御抗原SERAをα抗原をキャリアーとしてBCGから発現させることを試みた.SERAをコードする合成遺伝子をα抗原遺伝子の様々な場所に挿入し,合計7種類の組み換えBCGを作製した.それらを,試験管内で培養し,分泌抗原中の蛋白質を解析してきたが,現在までの所,十分量のSERA抗原を発現する,組み換えBCG菌は得られていない.この原因は,1;発現させるのにSERAの分子量が大きすぎる,2;SERA抗原の一定部位が分泌に適さない(不溶体を形成する),3;使用コドンの不適合,4;プロモーター活性が低い等の原因が考えられた.現在1,2の原因を解決すべく,SERA遺伝子を分割して,発現させることを試みている.また,α抗原以外のキャリアー蛋白質の検討を行い,抗体産生能の高いMDP1等の抗原とSERAの融合蛋白質を発現させる,プラスミッドを構築している.

The most important thing is to develop a new technology. Animals such as the defense effect is confirmed in the antigen, in fact, the safety and preparation of the vaccine is necessary, but not very good. In a joint study with Professor Hiroji Kanhara of the Institute of Thermodynamic Medicine, I organized a study on the use of BCG in the prevention of infection with red protozoa, and the prevention mechanism was established. Cellular immunity was induced in the prevention of antibody production. The results of several years of analysis showed that this year's report was published (J. Exp.Med., 1998). In addition, the BCG system has seven types of antigens-SERA, alpha antigen, and alpha antigen. In addition, the protein in the secreted antigen was analyzed in vitro, and now a large amount of SERA antigen was produced in vitro. The reasons for this are: 1. The molecular weight of SERA is too large for discovery; 2. Certain parts of SERA antigen are suitable for secretion (insoluble body formation); 3. The use of copper is not suitable; 4. The activity of SERA is low. Now that reasons 1 and 2 have been resolved, the SERA heritage will be divided and discovered. In addition, the fusion protein of SERA and MDP-1 antigen with high antibody production ability was developed during the study of protein other than alpha antigen.

项目成果

山田毅等,他3名: "Recombinant Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin secreting MSP1 induces protection against rodent malaria parasite infection depending on MSP1-stimulated interferopand parasite-specific antibodies." The Journal of Experimental Medicine.

Takeshi Yamada 和其他 3 人：“分泌 MSP1 的重组牛分枝杆菌卡介苗可根据 MSP1 刺激的干扰素和寄生虫特异性抗体诱导预防啮齿类疟疾寄生虫感染。”