気孔孔辺細胞における光情報伝達とH^+-ATPaseの活性制御

气孔保卫细胞中光转导和 H^+-ATPase 活性的调节

• 批准号: 11151224
• 负责人: 島崎 研一郎
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11151224/
• 关键词: 気孔; 孔辺細胞; 青色光; タンパク質のリン酸化; H^+-ATPase

昨年度の研究により青色光が孔辺細胞細胞膜H^+-ATPaseのC-末をリン酸化し、この酵素の活性化を引き起こす事を証明した。従って、この細胞膜H^+-ATPaseをリン酸化するプロテインキナーゼが存在し、その酵素が青色光により活性化される事が期待される。カビ毒フシコクシンもH^+-ATPaseを活性化するので、その様子と青色光による活性化の様子を比較した。カビ毒フシコクシンはH^+-ATPaseをリン酸化し、そのリン酸化はC-末に局限して起きた。また、リン酸化されるアミノ酸の種類はセリンとスレオニンであった。このリン酸化の様子は青色光とフシコクシンで全く同一であり、このリン酸化反応に同一のプロテインキナーゼが関与している事を示している。一方、青色光によるH^+-ATPaseのリン酸化はキナーゼ阻害剤K-252aに強く阻害された。しかし、フシコクシンによるリン酸化はほとんど阻害されなかった。この事実と一致して青色光によるH^+放出はK-252aで阻害されるが、フシコクシンによるH^+放出は阻害されなかった。このことは、H^+-ATPaseを直接リン酸化するキナーゼはK-252aに阻害されにくく、青色光情報伝達系のより上流のキナーゼはK-252aに感受性が高いことを示唆している。そこで、H^+-ATPaseの抗体を用いた免疫沈降産物中のプロテインキナーゼ活性を測定すると、H^+-ATPaseがリン酸化され、そのリン酸化にはカルシウムは必要とされなっかた。従って、H^+-ATPaseのC-末を基質とするカルシウム非依存性のプロテインキナーゼが孔辺細胞中に存在することが示唆された。現在このキナーゼを単離すべくTwo-hybrid法を用いたスクリーニングを遂行している。

In yesterday's study, the cyan light pore cell membrane H ^ +-ATPase C-terminal acidification and enzyme activation were introduced. The cell membrane H ^ +-ATPase was acidified, the enzyme was activated, the enzyme was activated, and the cell membrane was activated. The toxicant is different. The H^ +-ATPase is active. The cyan light is the most active. Poison, acid, ATPase, acid, acid, acid and acid. In the case of acid, acid and acid. In the case of acidizing, the blue light is the same, the acidification is the same, the acidizing is the same, and the acidizing is the same. One side, cyan light (H ^ +-ATPase), acidizing (acidification), blocking (KMUE) 252a (strong blocking). Please do not know how to acidify or prevent damage. Everything is consistent with the cyan light

项目成果

Kinoshita, T. and Shimazaki, K.: "Characterization of cytosolic cyclophilin from guard cells of Vicia fava L"Plant & Cell Physiol.. 40. 53-59 (1999)

Kinoshita, T. 和 Shimazaki, K.：“来自蚕豆保卫细胞的胞质亲环蛋白的表征”植物

Kinoshita,T.and Shimazakik: "Blue light activates the plasma membrane H^+-ATPase by phosphorylation of the C-terminus in stomatal guard cells."EMBO J.. 18. 5548-5558 (1999)

Kinoshita,T. 和 Shimazakik：“蓝光通过气孔保卫细胞中 C 末端的磷酸化来激活质膜 H+ -ATP 酶。”EMBO J.. 18. 5548-5558 (1999)

Shimazaki, K., Goh, C-H. and Kinoshita, T.: "Involvement of intracallular Ca^<2+> in blue light-dependent proton pumping inguard cellprotoplasts from Vicia faba"Physiol. Plant.. 105. 554-561 (1999)

岛崎，K.，吴，C-H。

Assmann,S,M. and Shimazaki,K.: "The multisensory guard cell : Stomatal responses to blue light and abscisic acid"Plant Physiol.. 119. 809-815 (1999)

阿斯曼，S，M。