体節形成における分節化開始機構の解析

体节形成过程中分割起始机制分析

• 批准号: 11152242
• 负责人: 相賀 裕美子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11152242/
• 关键词: 体節形成; 分節性; ノックアウトマウス; 前後極性; Notch1; プレセニリン; Dll1

われわれはすでに、Mesp2ノックアウト(KO)マウスを作製し、このマウスでは、体節の前部の特徴が失われている(後方化している)ことを明らかにしてきた。一方、古閑らによって作成された、PS-1KOマウスは、分節が起こらないといった点では、Mesp2KOマウスと類似した表現形を示すが、その前後極性に関して、対照的な前方化の表現形をしめす。ここで重要な事実として注目したのがDelta-1の発現パターンである。野生型におけるDelta-1の発現は、未分節中胚葉の最も尾部側で非常に強い発現を示すが、分節の直前で発現が低下するとともにその発現領域が体節の後半部分に局在しストライプパターンを示す。そしてDelta-1KOマウスは前方化の形質を示すのである。Mesp2KOマウスではDelta-1の尾芽部分の強い発現が持続し、ストライプも形成されない。すなわち、Mesp2は、Delta-1の発現を抑制するように働く。一方、PS-1KOマウスでは尾芽部分の発現は全く変わらないが、ストライプ部分での発現が完全に失われる。すなわち、*-1は体節の後方部におけるDelta-1の発現を誘導にかかわる。すなわち、ストライプ部分におけるDelta-1の発現量及びパターンがその後の脊椎骨の前後極性とよく一致していることがわかった。しかし、Mesp2KOマウスでは、Notch1の発現が減少しており、その下流にNotchシグナル系が働くことが示唆されていたが、Notchシグナル系に直接関与すると考えられるPS-1のKOマウスが全く逆の形質を示すのは驚きであり、さらに遺伝学的解析の必要性を示唆していた。そこでMesp2及びPS-1のダブルKOマウスを作成し解析した。その結果、ダブルKOマウスはMesp2と全く同様の形質を示すことが判明した。この結果は、単純なカスケードの上下関係では説明できない。そこで、この遺伝学的相互作用がどのような、分子機構によるのかを解析するため、以前作成したMesp2遺伝子座にNotch1をノックインしたマウスを利用してさらに解析をおこなった。Notch1ノックインマウスは一見Mesp2KOマウスと同様の表現形を示すが、Delta-1の発現は減少していることが判明しており、少なくとも、導入したNotch1はDelta-1の発現を抑制する働きを示す。そこで、このマウスとPS-1KOマウスを掛け合わせたところ、さらにDelta-1の発現が減少し、脊椎骨にも一部前方部の形質が現れたのである。すなわち、Delta-1の誘導にかかわるPS-1を介したNotchシグナル系を遮断することより、さらにDelta-1の発現が低下し、その結果、細胞は、前方の性質を示すようになったと考えられた。

わ れ わ れ は す で に, Mesp2 ノ ッ ク ア ウ ト (KO) マ ウ ス を as し, こ の マ ウ ス で は, somite の front の, 徴 が lost わ れ て い る (rear し て い る) こ と を Ming ら か に し て き た. Side, ancient idle ら に よ っ て made さ れ た ko, PS - 1 マ ウ ス は, segmental が up こ ら な い と い っ た point で は, Mesp2KO マ ウ ス と similar し た performance form を shown す が, そ の before and after the polarity に masato し て, according to the な seaborne front の performance form を し め す. {" id ": 13131359," text ":" で で Important な events と て て attention た が が delt-1 <s:1> occurrence パタ <s:1> である である である である である である である である" Wild type に お け る Delta - 1 の 発 は now, not section mesoderm の most も tail side で very strong に い 発 を now shown す が, segmental の way で 発 now low が す る と と も に そ の 発 fields が somite の after half に bureau in し ス ト ラ イ プ パ タ ー ン を す. Youdaoplaceholder0 てDelta-1KO ウス ウス ウス the forward transformation of the <s:1> physical form を indicates す である である である. The <s:1> tail bud part of Mesp2KO <s:1> ウスで が Delta-1 has a strong <s:1> occurrence of が holding 続 されな, ストラ プ プ プ forming されな プ. Youdaoplaceholder0, Mesp2 すなわち, Delta-1 <s:1> exhibit を inhibition するように く. Side, PS 1 ko マ ウ ス で は tail bud part の 発 は く all now - わ ら な い が, ス ト ラ イ プ part で の 発 が now entirely に lost わ れ る. Youdaoplaceholder0, the posterior part of the <s:1> of the *-1 における body segment におけるDelta-1 <s:1> shows を induction に に わる わる わる. す な わ ち, ス ト ラ イ プ part に お け る Delta - 1 の 発 now and び パ タ ー ン が そ の の after vertebra の before and after the polarity と よ く consistent し て い る こ と が わ か っ た. し か し, Mesp2KO マ ウ ス で は, Notch1 の 発 が now reduce し て お り, そ の obscene に Notch シ グ ナ ル department が 働 く こ と が in stopping さ れ て い た が, Notch シ グ ナ に ル department direct masato and す る と exam え ら れ る PS 1 の KO マ ウ ス が full く inverse の character を shown す の は surprised き で あ り, さ ら に 伝 Analysis of learning を Necessity を implication implication て た た Youdaoplaceholder0 た でMesp2 and びPS-1 ダブ ダブ ダブ KO で ウスを ウスを to form a <s:1> analysis た. そ の results, ダ ブ ル KO マ ウ ス は Mesp2 と full く with others の character を shown す こ と が.at し た. The <s:1> <s:1> result なカスケ and 単 are pure なカスケ ド ド ド ド 単 and the relationship between the upper and lower parts of <s:1> is で で, which indicates that で で な な で. そ こ で, こ の heritage 伝 learning interaction が ど の よ う な, molecular institutions に よ る の か を parsing す る た め, previously done し た Mesp2 heritage 伝 stroma に Notch1 を ノ ッ ク イ ン し た マ ウ ス を using し て さ ら に parsing を お こ な っ た. Notch1 ノ ッ ク イ ン マ ウ ス は saw Mesp2KO マ ウ ス と with others の performance form を shown す が, Delta - 1 の 発 は now reduce し て い る こ と が.at し て お り, less な く と も, import し た Notch1 は Delta - 1 の 発 now を inhibit す る 働 き を す. そ こ で, こ の マ ウ ス と PS 1 ko マ ウ ス を hang け close わ せ た と こ ろ, さ ら に Delta - 1 の 発 が reduce し, vertebra に も a front department の character が now れ た の で あ る. す な わ ち の induction, Delta - 1 に か か わ を る PS - 1 interface し た Notch シ グ ナ ル department を interrupt す る こ と よ り, さ ら に Delta - 1 の 発 が し, now そ の results, cell は, front の nature を shown す よ う に な っ た と exam え ら れ た.

项目成果

高橋雄: "分節化におけるNotchシグナリング:ノックアウトマウスの解析から"細胞工学. 18. 1334-1339 (1999)

Yu Takahashi：“分割中的 Notch 信号传导：基因敲除小鼠的分析”《细胞工程》18. 1334-1339 (1999)。

相賀裕美子: "Notchシグナル系の多様性"細胞工学. 18. 1284-1289 (1999)

Yumiko Aiga：“Notch 信号系统的多样性”细胞工程 18. 1284-1289 (1999)。

Yumiko Saga: "MesP1 is expressed in the heart precursor cells and required for the formation of a single heart tube"Development. 126. 3437-3447 (1999)

Yumiko Saga：“MesP1在心脏前体细胞中表达，是形成单个心管所必需的”。

Atsushii Sawada: "Zebrafish Mesp family genes,mesp-a and mesp-b are segmentally expressed in the presomitic mesoderm, and Mesp-b confers the anterior identity to the developing somites"Development. (2000)

Atsushii Sawada：“斑马鱼 Mesp 家族基因，mesp-a 和 mesp-b 在前体中胚层中分段表达，Mesp-b 赋予发育中体节的前体身份”。