低分子量熱ショックタンパク質の構造機能相関の研究

低分子量热休克蛋白结构与功能关系的研究

• 批准号: 11153221
• 负责人: 鈴木 厚
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11153221/
• 关键词: 低分子量熱ショックタンパク質; ストレス; 筋肉; シャペロン; MKBP

本研究補助金を利用することによって、すでに我々が筋肉に特異性が高い新規の低分子量熱ショックタンパク質(sHSP)として同定・命名していたMKBPの構造機能相関に関する研究を大きく進展させることができた。この結果、今後MKBPの生理的機能をさらに検討していく上で有用となる、変異体を設計するための基礎データを得ることができた。哺乳動物の筋肉中に多量に発現しているsHSPは5種存在し、それらが非常に選択的な相互作用を示すことによって2つの独立した会合体を形成していることを、我々はすでに明らかとしている。その中で、MKBPはホモ会合活性を示すとともに、HSBP3とも結合する。まず、こうしたMKBPの選択的会合特性に関与する分子上の領域を酵母two-hybrid systemを利用して検討した。そして、1)当初の予想に反して、選択的なホモ会合、およびHSPB3との結合両方に、MKBPを特異的な配列が存在するN、またはC末端は必要ではなく、むしろsHSP全般に保存されたα-crystallinドメインが関与していること、2)しかし、その2種の結合に必須な領域は微妙に異なり、ホモ会合にはその前半部分、HSPB3との結合にはこのドメイン全体が必須であること、3)MKBPの生理的気質と考えられる、筋強直性ジストロフィーキナーゼ(DMPK)との結合もやはりこのα-crystallinドメインのより広い領域が関与していること、などが示された。一方、今回初めてMKBP、およびHSPB3に関して他の既知のsHSP(HSP27)と同様なシャペロン活性を試験管内で確認することもできた。特にMKBPについては、その会合活性と同様に、このシャペロン活性にもN末端領域は必須ではなく、基本的な活性がα-srystallinドメインに存在することも確認できた。

The grant was used to study the relationship between structure and function of MKBP, and the relationship between structure and function of MKBP and the specificity of MKBP. As a result, the physiological function of MKBP will be discussed in the future. There are five kinds of HSP in mammalian muscles, and they are very important for the interaction between them. MKBP is the most effective way to improve the quality of products. The molecular domain of yeast two-hybrid system is related to the convergence characteristics of MKBP. 1) The initial desired orientation, selection, and alignment of MKBP in the binding region of HSPB3 and MKBP are necessary for the preservation of α-crystallin in the binding region of HSPB3 and MKBP in the first half of the binding region of HSPB3. HSPB3 and the combination of the two sides of the border must be completely different. 3) The physiological quality of MKBP and the rigidity of MKBP (DMPK) and the combination of the two sides of the α-crystallin border must be different. A party, the beginning of the current round, MKBP, HSPB3, related to other known sHSP(HSP27), and the same kind of activity test tube confirmed. In particular, MKBP has been identified as having a high activity in the N-terminal domain and a low activity in the α-srystallin domain.

项目成果

Sugiyama, Y. et al.: "Muscle develops a specific form of small heat shock protein complex composed of MKBP/HSPB2 and HSPB3 during myogenic differentiation"The Journal of Biological Chemistrg. 275(2). 1095-1104 (2000)

Sugiyama, Y. 等人：“肌肉在生肌分化过程中形成一种由 MKBP/HSPB2 和 HSPB3 组成的特定形式的小型热休克蛋白复合物”《生物化学杂志》。