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マイコプラズマ滑走運動を担うモータータンパク質のクローニング

负责支原体滑行运动的运动蛋白的克隆

基本信息

批准号：
11156220
负责人：
宮田真人
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Osaka City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

原核生物のMycoplasma mobileは、一秒間に平均2.5-4.0μm、すなわち、細胞長の3-5倍の速度でガラスの上を滑走する。この滑走運動はベン毛運動とは全く異なる機構によると考えられる。バクテリアの滑走運動は約100年前から報告されているが、まだその機構は明らかになっていない。本研究では、Mycoplasma-mobileの滑走運動について、以下を明らかにした。1.運動を詳細に解析し、運動には速度むらがないこと、頭部のみが駆動力を出していることを示した。2.以前にわれわれが単離した滑走変異株の一つにおいて、200KDaのタンパク質が欠失していることを見出し、そのタンパク質の構造を決定した。アスパラギンを多く含む酸性タンパク質で、一カ所の膜貫通領域を持っていた。またこの変異株は野生株とは異なり、生長段階に応じた細胞形態の変化を起こさなかった。3.滑走を阻害する抗体を作製し、その標的タンパク質の構造と細胞内における局在を明らかにした。標的タンパク質は62KD_aと33KD_aの二つからなり、62KD_aのものは、二カ所の膜貫通領域をもつ疎水性タンパク質で、一つの繰り返し配列を持っていた。どちらのタンパク質も細胞内では後部末端に局在していた。4.Mycoplasma pneumoniaeは滑走速度は遅いが、ガラスへの接着に必須なタンパク質が7つ知られている。本研究ではマイコプラズマのための蛍光抗体法を開発し、それらのタンパク質の細胞内局在を明らかにした。7つのタンパク質はどれも主に頭部に局在していた。さらにそれぞれのタンパク質の頭部への局在化の順序を明らかにした。

Mycoplasma mobile in prokaryotes is 2.5-4.0μm per second on average, 3-5 times faster than cell length. The sliding movement is different from the hair movement. The movement was reported about 100 years ago, and the organization was reported to be in the clear. In this study, Mycoplasma-mobile skidding movement was investigated. 1. Detailed analysis of movement, movement, speed, head, power, etc. 2. In the past, when there was a single slip and a different plant, the 200KDa material was missing, and the structure of the material was determined. The membrane penetration area of the membrane is maintained in the middle of the membrane. The wild plants are different, the growth stage is different, and the cell morphology is different. 3. Antibodies that block the flow of light and the structure of cells The target is 62KD_a, 33KD_a, 62KD_a, 62 In the middle of the cell, the posterior end of the cell is in the middle. 4. Mycoplasma pneumoniae slides away at a speed of 7 seconds. In this study, we developed a new method of photoantibody to detect the intracellular changes in human cells. 7 The first part of the book is about the first part of the book.