マイコプラズマの滑走性と走性の解析

支原体滑动和趋化性分析

• 批准号: 09780640
• 负责人: 宮田 真人
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09780640/
• 关键词: マイコプラズマ; 滑走運動; 変異株; 表面タンパク質; 接着器官; 必須因子

マイコプラズマは高等動植物の組織あるいは細胞中に寄生するバクテリアである。細胞は細胞壁を持たないフラスコ型をしており、ガラスなどの表面に張りつきながらその頭部方向へ向かって滑走運動をする。滑走運動は他のバクテリアにも見られるが、その仕組みは全く明らかになっていない。申請者は昨年度の研究で滑走できない変異株を初めて取得した。本年度はこれらの変異株を解析し、以下のことを明らかにした。(1)凍結置換法を用いて電子顕微鏡観察を行った場合に、滑走できる株でのみ、細胞の進行方向端に微細構造が見られる。(2)マイコプラズマは静置培養するとマイクロコロニーを形成し、この形成能は滑走運動能に依存する。また申請者は、滑走変異株の観察から、滑走運動が接着タンパク質の細胞表面における流れによって起こると考え、滑走に必須の表面タンパク質を検索した。その結果、細胞表面のプロテアーゼ処理によって滑走能と共に消失するタンパク質を見いだした。このタンパク質は54kDで膜局在性であった。またマイコプラズマの全細胞を抗原に用いてポリクローナル抗体を作成した。この抗体の一部はマイコプラズマの滑走運動を阻害し、62kDの膜局在性タンパク質を標的としていた。これまでに上記の二つのタンパク質を精製し、現在はその構造解析を行っている。さらに申請者はマイコプラズマの蛍光抗体染色法を開発し、滑走を担う接着器官の形成過程を調べた。その結果、以下のことが明らかになった。(1)新しい接着器官は以前からあるものの隣に形成され、細胞の反対の端に移動する。(2)新しい接着器官の形成におけるタンパク質の配置は、3つの段階に分けられる。

Youdaoplaceholder2 するバ テリアである テリアである テリアである テリアである in the cells of the <s:1> tissues of higher animals and plants コプラズ コプラズ に parasitism. The cell walls of cellular は を hold た な い フ ラ ス コ type を し て お り, ガ ラ ス な ど の surface に zhang り つ き な が ら そ の へ head orientation to か っ て slip movement を す る. Slip movement は he の バ ク テ リ ア に も see ら れ る が, そ の blackstone group み は く Ming all ら か に な っ て い な い. The applicant <s:1> in the previous academic year conducted <s:1> research on で sliding away で な な な を of the を initial めて of めて and obtained た た. Analysis of the を れら れら <s:1> variant strains of this year を, the following <s:1> とを とを clarification ら に に た た. Displacement method (1) freeze を with い 観 examine line を っ て electronic 顕 micro mirror た に, slip away で き る strains で の み, cell の way end に fine-structure が see ら れ る. (2) The static culture of すると ロコロニ コプラズ <e:1> ロコロニ を results in the formation of <s:1> and <s:1> <s:1>, and the formation of energy and the sliding energy of <s:1> are dependent on する. ま た applicants は, slip away - different strains の 観 examine か ら, slip movement が then タ ン パ ク qualitative の cell surface に お け る flow れ に よ っ て up こ る と え test, slip away に must の surface タ ン パ ク qualitative を 検 cable し た. そ の results, cell surface の プ ロ テ ア ー ゼ 処 Richard に よ っ て can slip off と disappear altogether に す る タ ン パ ク qualitative を see い だ し た. Youdaoplaceholder2 タ タ パ パ of the duroid パ 54kDで membrane local であった. ま た マ イ コ プ ラ ズ マ の whole-cell を antigen に with い て ポ リ ク ロ ー ナ ル antibody を made し た. <s:1> <s:1> antibody <e:1> one を <s:1> コプラズ <e:1> を sliding motion を inhibition <s:1>, 62kD <s:1> membrane localization タ <s:1> パ <s:1> mass を target と て て た た た. The れまでに れまでに is recorded in the previous line as <s:1> two タ タ パ パ パ パ パ the を of the <s:1> substance is refined <s:1>. Now, the structure of the <s:1> is analyzed in the を line って る る る. Youdaoplaceholder0 applicant さらに コプラズ コプラズ コプラズ <s:1> 蛍 photoantibody staining method を development さらに, sliding away を support う then the process of organ tissue formation を adjustment べた. Youdaoplaceholder0 そ results, the following そ とが とが indicates ら になった になった. (1) The new tla らある then forms され in the organ, and the <s:1> moves against the <s:1> end する in the cell. (2) The new <s:1> followed by the formation of the organ tissue におけるタ におけるタ パ パ, the distribution of the granular tissue tissue, and the 3 <s:1> segment に score けられる.

项目成果

Seto S.: "Cell reproduction and morphological changes in Mycoplasma capricolum." Journal of Bacteriology. 180. 256-264 (1998)

Seto S.：“山羊支原体的细胞繁殖和形态变化。”

Miyata M.: "Cell reproduction cycle of mycoplasma." Biochimie.

Miyata M.：“支原体的细胞繁殖周期。”

Zhu P.-P.: "Expression,purification and characterization of enzyme IIAglc of the phosphoenol pyruvate" Biochemistry. 36. 6947-6953 (1997)

Zhu P.-P.：“磷酸烯醇丙酮酸酶IIAglc的表达、纯化和表征”生物化学。

Seto S.: "Characterization of dnaA gene expression in Mycoplasma capricolum" TEMS Microbiology Letters. 150. 239-247 (1997)

Seto S.：“山羊支原体中 dnaA 基因表达的表征”TEMS 微生物学快报。

Miyata M.: "Asymmetrical progression of replication forks just after inltiation on Mycoplasma capricolum chromosome revealed by two-dimensional gel electrophoresis." Gene. 193. 39-47 (1997)

Miyata M.：“二维凝胶电泳揭示了山羊支原体染色体上启动后复制叉的不对称进展。”