マイコプラズマ細胞中に局在するタンパク質の網羅的探索

全面搜索支原体细胞中的蛋白质

• 批准号: 14014245
• 负责人: 宮田 真人
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Osaka City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014245/
• 关键词: マイコプラズマ; タンパク質局在; 細胞骨格; 滑走運動; 原核生物; 蛍光顕微鏡; 変異株

寄生性の真正バクテリアであるマイコプラズマは、細胞に極性を持ち、片方の端に膜が突きだした接着器官を形成する。これらは細胞骨格様構造により維持され、その形成は細胞分裂と同調して起こる。またタンパク質の局在を見た場合、マイコプラズマ細胞は、表面も内部も、頭、首、胴の3つにわけられる。さらにマイコプラズマは接着器官でガラスなどの表面に張り付いたまま、未知のメカニズムで頭部の方向に動く(滑走運動)。本研究は、Mycoplasma pneumoniaeとMycoplams mobileの2種を用いて、細胞中で軸方向に局在するタンパク質と細胞骨格を形成するタンパク質を探しだし、それらの構造と細胞中での挙動の全てを詳細に調べることを目標に行われた。その結果、(1)M. mobile細胞の頭部、首部、胴部のそれぞれに局在するタンパク質7つをモノクローナル抗体の標的タンパク質を調べることにより同定した。(2)抗体の作用、変異株、蛍光ラベルなどを用いて、上記タンパク質の機能の多くを明らかにした。その中で、滑走運動の中心的な役割を果たしているタンパク質の構造は既知の細胞運動とは全く異なるメカニズムを示唆していた。(3)M. pneumoniaeですでに細胞構築にかかわると考えられている7つのタンパク質の役割を、変異株と免疫蛍光法を用いて明らかにし、それらタンパク質の細胞構築における役割を考察した。(4)M. pneumoniaeのタンパク質局在をGFPで調べる方法を開発し、可能性のある遺伝子の中から、明らかに細胞中で局在する新規のタンパク質11個を同定した。また、それとは別に細胞骨格様構造を少しずつ溶解し、その時に溶け出すタンパク質を同定することで、新規の細胞骨格様タンパク質を同定した。

Parasitic cells are polarized, and the end of the membrane is formed into a joint organ. The structure of the cellular skeleton is maintained and the formation of cellular division is coordinated. In the case where the substance is present, the cell surface, the internal surface, the head, the head, and the body are not present. The movement of the head in the direction of the head (sliding movement) is not known. In this study, two kinds of Mycoplasma pneumoniae and Mycoplasma mobile were used in the axial direction of the cell. The structure of the cell was studied in detail. (1)M. The head, head, and body of a mobile cell are all in the same state. (2)The function of antibody, variant strain, light source, and function of antibody are described in detail. The structure of the center of the sliding motion is different from the known cell motion. (3)M. The cellular architecture of pneumoniae was examined by 7 different strains of plasmid, and the cellular architecture of plasmid was examined by immunoluminescence. (4)M. 11 new methods for regulating the quality of pneumoconiae in GFP were developed, and the possibility of regulating the quality of pneumoconiae in GFP was determined. In addition, the structure of the cellular bone is different, and the dissolution time is different.

项目成果

Shimizu, T.: "Electron microscopic studies of three gliding mycoplasmas, Mycoplasma mobile, M. pneumoniae, and M. gallisepticum, by using the freeze-substitution technique"Current Microbiology. 44. 431-434 (2002)

Shimizu, T.：“使用冷冻替代技术对三种滑动支原体、移动支原体、肺炎支原体和鸡毒支原体进行电子显微镜研究”《当代微生物学》。

Miyata, M.: "Cell division"Hertmann, R. and Razin, S. (ed.) Molecular Biology and Pathogenicity of Mycoplasmas. Kluver Academic / Plenum Publishers., London. 117-130 (2002)

Miyata, M.：“细胞分裂”Hertmann, R. 和 Razin, S.（编辑）支原体的分子生物学和致病性。

宮田真人: "Mycoplasma mobileのglidingと病原性"臨床と微生物. 30. 015-019 (2003)

宫田正人：“移动支原体的滑翔和致病性”临床和微生物学 30. 015-019 (2003)。

Miyata, M.: "Force and Velocity of Mycoplasma mobile Gliding"Journal of Bacteriology. 184. 1827-1831 (2002)

Miyata, M.：“支原体移动滑翔的力和速度”细菌学杂志。

Miyata, M.: "Movement on the cell surface of gliding bacterium, Mycoplasma mobile, is limited to its head-like structure"FEMS Microbiology Letters. 215. 285-289 (2002)

Miyata, M.：“滑动细菌（移动支原体）在细胞表面的运动仅限于其头状结构”FEMS 微生物学快报。