プロスタノイド受容体とアポ蛋白E欠損マウスのかけ合わせによる動脈硬化発症機構

前列腺素受体与脱辅基蛋白E缺陷小鼠结合引起动脉粥样硬化的机制

基本信息

批准号：
11158211
负责人：
小林拓也
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

動脈硬化は、マクロファージの内皮下への侵入、内皮細胞の傷害・脱落、血小板の粘着・凝集、脂質の沈着、中膜平滑筋細胞の遊走・増殖などの過程を経て発症・進展する。この各段階において、トロンボキサン(TX)とプロスタグランジン(PG)より成る生理活性物質であるプロスタノイドが何らかの役割を果たすと考えられている。我々の研究室では、既に薬理学的に同定された8種類のプロスタノイド受容体のcDNAを全てクローニングし、8種類のプロスタノイド受容体欠損マウスを作製した。そこで、C57BL/6に10回以上戻し交配の済んだPGIとTX受容体欠損マウスに、同様にC57BL/6に4回戻し交配の済んだアポ蛋白E欠損マウスをかけ合わせた。得られたPGI受容体とアポ蛋白EのダブルへテロマウスとTXA受容体とアポ蛋白Eのダブルへテロマウスを各々ダブルへテロ交配した。現在、ダブルへテロ交配により生まれたマウスから、PGI受容体とアポ蛋白EそしてTX受容体とアポ蛋白Eを共に欠損するマウスをPCRにて確認している。今後は、このようにして得られたダブルノックアウトマウスを繁殖させ、組織学的な解析を行う予定である。具体的には、近位大動脈、冠動脈、肺動脈等の動脈硬化病変形成を解析する。内皮細胞の傷害、血栓形成、脂質の沈着、平滑筋細胞の遊走・増殖、内膜の肥厚等を観察する。また、血圧、心拍数の測定、腎機能の解析、血中リポ蛋白分画の解析等を行う。

动脉硬化发展并通过诸如进入内皮下皮下皮下皮细胞的巨噬细胞，血小板粘附和聚集，脂质沉积以及内侧平滑肌细胞迁移和增殖的过程发展和进展。据信，前列腺素是由血栓烷（TX）和前列腺素（PG）组成的生理活性物质，在这些步骤中的每个步骤中都起着一定作用。在我们的实验室中，将八个已经鉴定出的前列腺素受体的八个cDNA克隆起来，以产生八只前列腺素受体缺陷的小鼠。因此，与C57BL/6插入了至少10次的PGI和TX受体缺陷小鼠，并用C57BL/6插入了四次后跨四次的载蛋白E缺陷型小鼠。获得的PGI受体和载脂蛋白E的双重杂音，TXA受体和丙蛋白E的双杂音蛋白E均为异伴蛋白。目前，PCR已经证实了由双重异性碎片出生的小鼠，这些小鼠既缺乏PGI受体，载脂蛋白E和TX受体和载蛋白。具体而言，分析了近端主动脉，冠状动脉，肺动脉等中动脉粥样硬化病变的形成。观察到内皮细胞，血栓形成，脂质沉积，平滑肌细胞迁移和增殖以及内膜增厚。此外，还测量了血压和心率，进行肾功能分析，血液脂蛋白分数分析等。