Klonierung und Sequenzierung des Gens für ß-Poly(L-Malat)-Hydrolase aus Physarum polycephalum

多头绒泡菌 γ-聚（L-苹果酸）水解酶基因的克隆和测序

• 批准号: 5297988
• 负责人: Professor Dr. Eggehard Holler
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biophysik und physikalische Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1995-12-31 至 2000-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5297988?language=en
• 关键词: Klonierung; und; Sequenzierung; des; Gens

b-Poly(L-Malat)-Hydrolase (Polymalatase) von Physarum polycephalum spaltet b-Poly(L-Malat) (PMLA). Diesem wird eine essentielle Rolle beim Zustandekommen der Synchronität der DNA-Replikation in Plasmodien zugeschrieben. Das PMLA-abbauende Enzym wurde isoliert und protein-chemisch charakterisiert. Es entsteht aus einem 200 kDa Vorläufer durch proteolytische Aktivierung. Neueste Evidenzien sprechen zudem für eine Adapterfunktion beim Transport des Polymeren sowie für eine durch Phosphorylierung-Dephosphorylierung regulierte Aktivierung. Die cDNA der 97 kDa Hydrolase wurde nahezu vollständig sequenziert sowie größere Bereiche des pmal-Gens. Die Intron-Exon-Struktur für den bekannten Sequenzbereich wurde charakterisiert. Datenbankvergleiche ergeben keine Verwandtschaft mit bekannten Genen. Im bevorstehenden dritten Projektjahr ist beabsichtigt, die Sequenzierungsarbeiten abzuschließen und die Existenz des postulierten Vorläuferproteins zu klären. Für weiterführende Untersuchungen soll Polymalatase bzw. das Vorläuferprotein rekombinant synthetisiert werden. Die biologische(n) Funktion(en) soll(en) mit Hilfe von insbesondere Knock-Out-Mutanten charakterisiert werden.

b-聚（L-苹果酸）-多头绒泡菌水解酶（聚苹果酸酶）spalte b-聚（L-苹果酸）（PMLA）。这是疟原虫DNA同步化的一个重要作用。PMLA-abbauxin酶具有分离和蛋白质化学特性。这是一个200 kDa的蛋白水解激活蛋白。Neueste Evidenzien sprechen zudem für eine Adapterfunktion beim Transport des Polymeren sowie für eine durch Phosphorylierung-Dephosphorylierung regulierte Aktivierung. 97 kDa水解酶的cDNA将在pmal基因组中进行测序。内含子-外显子-结构可用于确定序列。数据银行没有与其他金融机构合作。Im bevorstehenden dritten Projektjahr ist beabsichtigt，die Sequenzierungsarbeiten abzuschließen und die pastulierten Vorläuferproteins zu klären. Für weiterfüchte de Untersuchungen soll Polymalatase bzw. das Vorläuferprotein rekombinant synthetisiert韦尔登。生物学功能是通过基因敲除-突变特性的支持韦尔登来实现的。