Aufklärung der Funktion der intrazellulären Domänen von Kinin-Rezeptoren bei Signaltransduktion, Internalisierung und Degradation

阐明激肽受体胞内结构域在信号转导、内化和降解中的功能

• 批准号: 5298706
• 负责人: Professor Dr. Alexander Faußner
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Prophylaxe und Epidemiologie der Kreislaufkrankheiten
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5298706?language=en
• 关键词: Aufkl; rung; der; Funktion; intrazellul

Am Modell der Kinin-Rezeptoren sollen die Funktionen der intrazellulären Domänen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) bei der Signaltransduktion, der Rezeptorinternalisierung und des Rezeptorabbaus untersucht werden. Durch Expression von Chimären des B2 Kinin-Rezeptors, der wie die meisten GPCRs internalisiert und rezyklisiert wird, und des nicht internalisierenden B1 Kinin-Rezeptors, sowie der internalisierenden, aber nicht rezyklisierenden Protease-aktivierten Rezeptoren Par 1 und Par 2 in Säugetierzellen soll bestimmt werden, welche Domänen an der Internalisierung und am Abbau dieser Rezeptoren beteiligt sind. Durch Immun-Kopräzipitation sowie durch ein Yeast Two-Hybrid-System (CytoTrap/Stratagene), das speziell für cytosolische und membranständige Proteine entwickelt wurde, sollen mit den intrazellulären Rezeptordomänen interagierende Proteine identifiziert werden. Durch stabile Transfektion mit Plasmiden, die Tetracyclin-regulierbare Promotoren mit Sense- und Anti-Sense-Sequenzen von neugefundenen, wie auch von alten, bekanntermassen mit GPCRs wechselwirkenden Proteinen (wie z.B. G-Proteinuntereinheiten, Arrestinen, Rezeptorkinasen) enthalten, sollen Zelllinien geschaffen werden, in denen diese Proteine kontrolliert (über)exprimiert bzw. supprimiert werden können. Auf diese Weise könnten ihre Wechselwirkungen mit (transient) koexprimierten GPCRs einfacher und genauer untersucht werden als mit den bisherigen Methoden.

Am modell der Kinin-Rezeptoren Sollen die Funktionen der in zellellulären Domänen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren(GPCRs)be der der SignalTransduktion，der Rezeptorinsierung and des Rezeptorabbaus untersuht.在这个过程中，我们看到了GPCRS的内部机制，也就是B1Kinin-Rezeptors、Sowie der Internetisierenden Prozyklisierenden Protease-aktivierenden Protease-aktivieren Rezenden Protease-aktivieren-Rezeperden Rezeptors 1 and Par 2 in Säugetierzellen soll bstimt den，更好地理解了这一点。在酵母双杂交系统(CytoTrap/Stratagene)中进行免疫-Kopräzipation，das Speziell für胞质溶解和膜蛋白缠绕，Sollen MIT den inzellulären Rezeptordonänen Interagierende Proteine Genfiziert。经过稳定的转移和四环素调节的促进和四环素促进和反义序列的von neugefundenen，我们这样的von alten，bekanntemassen MIT GPCRs我们自己的蛋白质(即Z.B.G-Proteinuntereinheiten，Arstainen，Rezeptorkinasen)的眼球，Sollen Zelllinien geschaffen(Sollen Zelllinien Geschaffen)，在蛋白质的蛋白质(über)原基被排除的原基。这是一种暂时性的GPCR和GPCRs，但不适用于Bisherigen方法。