プテリン誘導体の呼吸鎖における過酸化水素産生とそれにより生じる細胞傷害との関係

蝶呤衍生物呼吸链中过氧化氢的产生与细胞损伤的关系

基本信息

批准号：
11877264
负责人：
荒井俊之
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

まず、6-Formylpterin(6FP)が、ミトコンドリアの電子伝達系(呼吸鎖)で酸素と競合して電子を受容し、最終産物として過酸化水素を生成するか否かを調べた。・酸素電極を用いて、ヒト前骨髄球性白血病細胞株HL-60の酸素消費に及ぼす6FPの影響を検討したところ、6FPを加えることにより、酸素消費は増加したが、この増加は、ロテノンやアンチマイシン等の呼吸鎖阻害剤を用いても抑制することが出来ず、検討の結果、6FPは呼吸鎖で酸素と競合するのではなく、NAD(P)Hと反応して酸素を消費し、活性酸素を生じることが分かった。次に、6FPがNAD(P)Hと反応して生じた活性酸素が細胞にどのような影響をもたらすかを調べた。・細胞は、ヒト前骨髄球性白血病細胞株HL-60、ヒト膵臓癌樹立細胞株Panc1ならびにヒトT細胞白血病細胞株Jurkatを用いた。・HL-60細胞の培養液に6FPを加え、0-2mMの濃度とし、3時間後にアポトーシスの有無を観察したところ、1-2mMの6FPはアポトーシスを誘導した。・Panc1細胞の培養液に6FPを加え、0-2mMの濃度とし、24、48、72、96時間後にブロモデオキシウリジンの取り込みをみることにより、細胞増殖への影響を検討したところ、1-2mMの6FPは細胞増殖を抑制した。・Jurkat細胞をFas刺激によりアポトーシスを誘導したところ、50-100μMの6FPはアポトーシスにともなうDNAの断片化を抑制した。・以上の結果より、6FPは細胞内で活性酸素を生じ、その活性酸素が、細胞種や発生量や周りの状況に応じて、アポトーシスの誘導、細胞増殖の抑制、Fas誘導性アポトーシスの抑制等をもたらすことが分かった。

首先，检查了6-甲基甲基蛋白（6FP）是否在线粒体电子转移系统（呼吸链）中与氧气竞争以接收电子，并产生过氧化氢作为最终产物。 - 当我们使用氧电极研究6FP对人类前临床细胞性白血病细胞系HL-60的影响时，我们发现增加6FP增加了氧气的消耗量，但即使在呼吸链抑制剂（如呼吸中）和6FP的呼吸群体，也无法抑制这种增加与NAD（P）H反应食消耗氧，产生活性氧。接下来，我们研究了6FP与NAD（P）H反应产生的活性氧对细胞有影响。细胞是人类临时性白血病细胞系HL-60，人类胰腺癌建立的细胞系PANC1和人类T细胞白血病细胞系Jurkat。将6FP添加到HL-60细胞培养基中，并将浓度设置为0-2 mm，3小时后，观察到存在或不存在凋亡。 1-2 mm 6fp诱导凋亡。 - 当将6FP添加到PANC1细胞的培养基中时，浓度为0-2 mm，并通过监测24、48、72和96小时和6FP在1-2 mm抑制细胞增殖后测量溴脱氧尿苷的摄取来检查细胞增殖的影响。 - 当通过FAS刺激诱导Jurkat细胞凋亡时，50-100μM6FP抑制与凋亡相关的DNA碎片。 - 上面的结果表明，6FP在细胞内产生活性氧，并且活性氧导致凋亡，细胞增殖的抑制以及FAS诱导的凋亡等抑制，具体取决于细胞类型，发电量和周围条件。