酵母におけるシグナル活性化因子遺伝子の網羅的破壊によるシグナルネットワークの解析

通过全面破坏酵母信号激活基因来分析信号网络

• 批准号: 12206057
• 负责人: 宮本 昌明
• 金额: --
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12206057/
• 关键词: GEF; 遺伝子破壊; シグナル伝達

<背景と目的>各生物のゲノムプロジェクトが進み、種々の解析が行われるにしたがって、シグナル伝達に関わる因子は構造上保存されているばかりでなく、制御の方法も共通の仕組みを使っていることがわかってきた。ヒトをはじめとする高等動物では構造上似かよった遺伝子が多く、産物がどのように機能分担して働き、下流因子にシグナルを伝えているのかを解析することは多くの困難を伴う。それに対して酵母はシグナル伝達の基本的な制御機構は保存されていながら遺伝子の数も少なく遺伝学的手法を用いた種々の解析が容易である。外界からのシグナルを細胞内に伝え始める因子としてguanine nucleotide exchange factor(GEF)に注目し、分裂酵母のGEF遺伝子を網羅的に破壊して解析を行うことによりGEFを介した細胞内のシグナルネットワークがどのように制御されているのかについて明らかにする。<検討結果>DH/PHドメインはGEF活性を担う機能ドメインである。DH/PHドメインを指標に分裂酵母のゲノムデータベースの検索を行い、7つのGEFを同定した(SPAC1006.6,SPAC16E8.09,SPAC24H6.09,SPAC31A2.16,SPBC29A3.17,SPCC645.05C,SPCC645.07)。これらはGEF活性を担うドメインの他、ショウジョウバエや動物細胞でシグナル伝達に関わる因子と相同性をもつ領域を複数持っていた。これら7つの遺伝子の染色体遺伝子クローンおよびcDNAクローンを取得・単離した。染色体遺伝子クローンからは遺伝子破壊株を得るためのターゲッティングベクターを構築し、diploid株に導入して組換え体を得た。現在解析中ではあるが、そのうち1つの遺伝子破壊株(SPAC16E8.09)はhaploid化してviableであった。この株は栄養増殖にはほとんど影響はなかったものの細胞の形態が丸く(野性株では桿状)なっており接合能が著しく低下していた。

<Background> All organisms need to be able to analyze and analyze the relationship between the species and the structure. The higher animals are structurally similar to each other, and the products are functionally shared. The downstream factors are analyzed in detail. The basic control mechanisms for the transmission of DNA are preserved and the number of DNA fragments is reduced. In addition, the GEF gene expression in the yeast cells was detected by the guanine nucleotide exchange factor(GEF), and the GEF gene expression in the yeast cells was detected by the GEF gene expression system. <Search Results>DH/PH GEF Activity DH/PH is the same as GEF (SPAC1006.6, SPAC16E8.09, SPAC24H6.09, SPAC31A2.16, SPBC29A3.17, SPCC645.05C, SPCC645.07). The GEF activity is related to the presence of other factors in animal cells and the presence of multiple domains of identity. 7. The DNA sequence of the chromosome is isolated. Chromosome gene transfer, chromosome transformation, chromosome transformation Now analyze in This plant grows and grows, and affects the morphology of the cells.(Wild plants grow in rods)