細胞周期制御因子による癌細胞の分化、増殖、アポトーシスのスイッチ機構とシグナル伝達

细胞周期调节因子对癌细胞分化、增殖和凋亡的开关机制和信号转导

• 批准号: 12215141
• 负责人: 土橋 洋
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215141/
• 关键词: cyclin; cdk; PC12; cdc2; アポトーシス; 細胞分化

本年度はラット褐色細胞腫(PC12),ヒト肺神経内分泌癌から樹立した細胞株、血球系細胞等の系で癌抑制遺伝子、細胞周期制御因子蛋白の過剰発現、発現抑制による分化やアポトーシスの誘導の有無、その際下流で機能する分子の解析を行った。1)PC12のNerve growth factor(NGF)による分化過程で癌抑制遺伝子蛋白APCの発現は亢進する(Biochem.Biophys.Res.Comm.1996)。逆にアンチセンスベクター導入実験により、APCは分化の初期段階に必須であるが、分化形質の保持には不要である事を明らかにした。(Biochcm.Biophys.Res.Comm.2000)2)PC12のNGFによる分化はcdk2,cdc2単独の過剰発現で阻害される。しかし、アンチセンセや特異的阻害剤を用いた実験から分化誘導にはcdk2,cdc2両方の活性の抑制が必要であった。つまりPC12細胞の分化はcdc2,cdk2両方によってredundantに制御されている事が予想された。(J.Biol.Chem.2000,第59回日本癌学会、第23回日本分子生物学会発表)3)PC12の他,我々が樹立した肺小細胞癌、大細胞神経内分泌癌、血球系、RB蛋白質が不活化した細胞株等を用いて種々のcyclins,cdkの潜在機能を検索した結果、どの株でもcdk4,cyclin D1の過剰発現によりアポトーシスが誘導された。この事よりcdk4,cyclin D1は比較的普遍的なアポトーシスのメディエーターとして機能しうる可能性が予想された。(2000年、第59回日本癌学会、第23回日本分子生物学会発表)4)3)の系路を解析するためPC12に一過性にcdk4を過剰発現させた細胞を染色後、ソーティングし、親株とのサブトラクションにより変動遺伝子を検索した。その結果、既知のプロテアーゼにホモロジーを有する新規の遺伝子を含む数種の遺伝子がクローニングされ、現在解析中である。(2001年、第24回日本分子生物学会発表予定)

This year, we conducted molecular analysis of tumor suppressor genes and cell cycle control factor proteins in cell lines and blood cell lines established from lung endocrine cancer (PC12), differentiation, induction, and downstream functions. 1) The expression of cancer suppressor protein APC is enhanced during differentiation of PC12 by Nerve growth factor(NGF)(Biochem. Biophys. Res. Comm. 1996). In the initial stage of differentiation, APC must maintain the quality of differentiation. (Biochcm. Biophys. Res. Comm. 2000)2) PC12 NGF differentiation and cdk2, cdc2 single pathway inhibition. It is necessary to inhibit the activity of cdk2, cdc2 when differentiation is induced. The differentiation of PC12 cells is controlled by cdc2, cdk2 and redundant factors. (J.Biol.Chem.2000, 59th Japanese Cancer Society, 23rd Japanese Molecular Biology Society)3) PC12 and its related proteins have been used to establish small cell lung cancer, large cell endocrine carcinoma, cell lines, RB protein inactivation, cell lines, etc. The potential function of cyclins,cdk has been explored, and the expression of cyclin D1 has been induced. The possibility of comparing the common features of CDK4,cyclin D1 is considered. (2000 The 59th Japanese Cancer Society, the 23rd Japanese Molecular Biology Society report)4)3) Pathway analysis: PC12, transient cdk4, cell staining, detection of cell migration, and detection of cell migration. The results of the study show that there are several kinds of new genes in the genetic analysis of existing genes. (2001 The 24th Japanese Molecular Biology Society

项目成果

Murai,Y.: "Study on the role of G1 cyclins for Epstein-Barr virus-associated human lymphomas maintained in SCID mice."Int.J.Cancer. (In Press.).

Murai,Y.：“G1 细胞周期蛋白对 SCID 小鼠体内 Epstein-Barr 病毒相关人类淋巴瘤的作用研究。”Int.J.Cancer。

Noguchi,T.: "Involvement of cyclins in cell proliferation and their clinical implications in soft tissue smooth muscle tumors."Am.J.Pathol.. 156(6). 2135-2147 (2000)

Noguchi,T.：“细胞周期蛋白参与细胞增殖及其在软组织平滑肌肿瘤中的临床意义。”Am.J.Pathol.. 156(6)。

Dobashi,Y.: "Simultaneous suppression of cdc2 and cdk2 activities induces neuronal differentiation of PC12 cells."J.Biol.Chem.. 275(5). 12572-12580 (2000)

Dobashi,Y.：“同时抑制 cdc2 和 cdk2 活性可诱导 PC12 细胞的神经元分化。”J.Biol.Chem.. 275(5)。

Dobashi,Y.: "APC protein is required for initiation of neuronal differentiation in rat pheochromocytoma PC12 cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 279(2). 685-691 (2000)

Dobashi,Y.：“大鼠嗜铬细胞瘤 PC12 细胞中神经元分化的启动需要 APC 蛋白。”Biochem.Biophys.Res.Commun. 279(2)。