Struktur/Funktionsbeziehungen nicht-mitochondrialer Nukleotidtransporter

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Plastiden und einige zelluläre Bakterien besitzen Nukleotidtransporter, die kaum strukturelle Ähnlichkeit zum mitochondrialen ADP/ATP-Carrier aufweisen. Die funktionelle Bedeutung konservierter Aminosäurereste des plasitidären ATP/ADP-Transporters aus Arabidopsis thaliana (AATP1, At) soll überprüft werden. Zur Ermittlung wichtiger biochemischer Kenngrößen, wie etwa der Effekt von pH- oder Ladungsgradienten auf den Transportvorgang, werden die nicht mitochondrialen Nukleotidtransporter heterolog exprimiert, anschließend angereichert und in Proteoliposome rekonstruiert. Das Bakterium Chlamydia trachomatis besitzt zwei mit dem plastidären ATP/ADP-Transporter eng verwandte Nukleotidtransporter (NPT1 und NPT2). NPT1 arbeitet als ATP/ADP-Antiporter, NPT2 kataylsiert einen netto Nukleotidimport. Das Nukleotidbindungszentrum von NPT1(Ct) soll mittels kovalenter Kopplung von 32P-8-Azido-ATP identifiziert werden. Wir werden chimäre Konstrukte von NPT1 und NPT2 herstellen, um zu ermitteln, welche Domänen in den beiden Proteinen für die unterschiedlichen Transporteigenschaften verantwortlich sind.