Isolierung und Charakterisierung von Genen für Metabolit-Permeasen des Glyoxylatzyklus in der peroxisomalen Membran

在allen真核生物Zellen中，mit过氧化物异构体m<s:1> ssen代谢物<e:1> ber die过氧化物异构体膜转运体werden。Bisher ist nur eine der dafr nötigen Permeasen bekant。[1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][3]。真核生物中Glyoxylatzyklus酶的研究。在der Regel befinden sich die Enzyme， die der Glyoxylat- mit dem Citratzyklus teilt, In den Mitochondrien, während die f<e:1> r den glyoxylweg spezifischen Enzyme In Peroxisomen lokalisiert sind。在allen bisher的研究中，研究人员发现了过氧化物异构体中的Malat-Synthase。“灰曲霉”、“粗神经孢子虫”、“热带假丝酵母”和“棉丝Ashbya”等异柠檬酸裂解酶在过氧化物酶中存在，在“酿酒酵母菌”中存在，在“酿酒酵母菌”中存在。“酿酒酵母”代谢产物<s:2>过氧化物异构体膜nötig。1 .基因序列<s:1>过氧化物异体基因（Permeasen zu isolieren），研究了“棉蚜”和“葡萄球菌”的缺失[j]。PTS1（过氧化物酶体靶向序列）的插入和异柠檬酸裂解酶基因的插入，使其完全断裂，die subzelluläre lockalisation umgekehrt werden。[1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1]。<s:1>琥珀酸钠，异氰酸钠。

In allen eukaryotischen Zellen mit Peroxisomen müssen Metabolite über die peroxisomale Membran transportiert werden. Bisher ist nur eine der dafür nötigen Permeasen bekannt. Das beantragte Projekt stellt einen Ansatz zur Isolierung zweier Gene von im Glyoxylatzyklus integrierten Permeasen dar. Die Enzyme des Glyoxylatzyklus sind in Eukaryonten in verschiedenen Zellkompartimenten lokalisiert. In der Regel befinden sich die Enzyme, die der Glyoxylat- mit dem Citratzyklus teilt, in den Mitochondrien, während die für den Glyoxylatweg spezifischen Enzyme in Peroxisomen lokalisiert sind. In allen bisher untersuchten Pilzen befindet sich die Malat-Synthase in Peroxisomen. Die Isocitrat-Lyase wurde bei "Aspergillus nidulans", "Neurospora crassa", "Candida tropicalis" und "Ashbya gossypii" ebenfalls in den Peroxisomen, in "Saccharomyces cerevisiae" jedoch im Zytoplasma lokalisiert. Diese Besonderheit von "S. cerevisiae" macht den Transport anderer Metabolite über die peroxisomale Membran nötig als bei den übrigen Pilzen. Um Gene für peroxisomale Permeasen zu isolieren, soll bei "A. gossypii" und "S. cerevisiae" durch Deletion bzw. Insertion der PTS1 (peroxisomal targeting sequence) an den Isocitrat-Lyase-Genen sowie durch gegenseitigen Austausch der kompletten Strukturgene, die subzelluläre Lokalisation umgekehrt werden. Mit diesen Mutanten, die aufgrund der geänderten Lokalisation der Isocitrat-Lyase wahrscheinlich eine Wachstumshemmung zeigen, soll dann versucht werden, durch heterologe Komplementation Gene für die jetzt nötige peroxisomale Permease, d.h. für Glyoxylat bzw. für Succinat, zu isolieren.