Isolierung und Charakterisierung von Genen für Metabolit-Permeasen des Glyoxylatzyklus in der peroxisomalen Membran

过氧化物酶体膜中乙醛酸循环代谢物渗透基因的分离和表征

• 批准号: 5305868
• 负责人: Professor Dr. Klaus-Peter Stahmann
• 金额: --
• 依托单位: Fachgebiet Technische Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5305868?language=en
• 关键词: Isolierung; und; Charakterisierung; von; Genen

In allen eukaryotischen Zellen mit Peroxisomen müssen Metabolite über die peroxisomale Membran transportiert werden. Bisher ist nur eine der dafür nötigen Permeasen bekannt. Das beantragte Projekt stellt einen Ansatz zur Isolierung zweier Gene von im Glyoxylatzyklus integrierten Permeasen dar. Die Enzyme des Glyoxylatzyklus sind in Eukaryonten in verschiedenen Zellkompartimenten lokalisiert. In der Regel befinden sich die Enzyme, die der Glyoxylat- mit dem Citratzyklus teilt, in den Mitochondrien, während die für den Glyoxylatweg spezifischen Enzyme in Peroxisomen lokalisiert sind. In allen bisher untersuchten Pilzen befindet sich die Malat-Synthase in Peroxisomen. Die Isocitrat-Lyase wurde bei "Aspergillus nidulans", "Neurospora crassa", "Candida tropicalis" und "Ashbya gossypii" ebenfalls in den Peroxisomen, in "Saccharomyces cerevisiae" jedoch im Zytoplasma lokalisiert. Diese Besonderheit von "S. cerevisiae" macht den Transport anderer Metabolite über die peroxisomale Membran nötig als bei den übrigen Pilzen. Um Gene für peroxisomale Permeasen zu isolieren, soll bei "A. gossypii" und "S. cerevisiae" durch Deletion bzw. Insertion der PTS1 (peroxisomal targeting sequence) an den Isocitrat-Lyase-Genen sowie durch gegenseitigen Austausch der kompletten Strukturgene, die subzelluläre Lokalisation umgekehrt werden. Mit diesen Mutanten, die aufgrund der geänderten Lokalisation der Isocitrat-Lyase wahrscheinlich eine Wachstumshemmung zeigen, soll dann versucht werden, durch heterologe Komplementation Gene für die jetzt nötige peroxisomale Permease, d.h. für Glyoxylat bzw. für Succinat, zu isolieren.

在艾伦真核生物中，过氧化物酶体的代谢物都是过氧化物酶体膜转运的韦尔登。比舍尔只是一个不能渗透的人。该项目将在整合渗透压的葡萄糖酵母中分离两种基因。Glycoatzyklus的酶在真核生物中被广泛应用。在酶的规则中，在线粒体中，Glycosidase与Citratzyklus结合，在过氧化物酶中，Glycosidase是一种特殊的酶。在艾伦中，Pilzen发现了过氧化物酶中的苹果酸合酶。异柠檬酸裂合酶在“构巢曲霉”、“粗糙脉孢菌”、“热带假丝酵母”和“棉阿舒囊菌”中均存在过氧化物酶，在“酿酒酵母”中也存在。Diese Besonderplatz von“S.啤酒”macht den Transport anderer Metabolite über die peroxisomale Membran nötig als bei den übrigen Pilzen.在“A”旁边有一个过氧化物酶体的基因。gossypii”und“S. cerevisiae”durch Deletion bzw.插入PTS1（过氧化物酶体靶向序列）和异柠檬酸裂合酶基因，通过复杂结构基因的基因定位，实现了亚细胞定位韦尔登。通过突变，异柠檬酸裂合酶的基因定位可以通过一个Wachstumshemmung zeigen来实现，这可以通过韦尔登，通过异源互补基因来实现。für Glycerol at bzw.为了琥珀，你要孤立。