二枚貝キャッチ筋の収縮制御機構の解明

双壳类捕获肌收缩控制机制的阐明

• 批准号: 12876047
• 负责人: 渡部 終五
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12876047/
• 关键词: ムラサキイガイ; キャッチ筋; twitchin; カルポニン; cDNAクローニング; リン酸化; 前足牽引筋; Aキナーゼ

二枚貝の閉殻筋(キャッチ筋)が行う低エネルギー消費で長時間の収縮制御機構は、著名な研究者がその解明を目指したにもかかわらず、50年以上にわたって不明のままとされてきた。最近、申請者らは、二枚貝キャッチ筋につき、キャッチ収縮からの弛緩時に筋細胞内の分子量7,000,000以上の巨大弾性タンパク質twitchinがリン酸化することを発見した。そこで本研究では、twitchinのリン酸化部位を同定するとともに、遺伝子工学的手法でtwitchin分子の構造および機能の特徴を明らかにし、キャッチ筋の収縮制御機構につき、この方面からの解明を目指した。まず、ムラサキイガイ前足牽引筋(ABRM)のAキナーゼによるリン酸化反応を行ったところ、1モルあたり3モルのリン酸が取り込まれた。次に、リン酸化twitchinのトリプシン完全消化物から単離したリン酸化ペプチドのアミノ酸配列は、RPSLVDVIPDQPTLQHRおよびRPSMSPAPEVと決定され、それぞれ3残基目のセリンがリン酸化していることが明らかにされた。便宜上、これらペプチドをそれぞれD1およびD2とした。次に、cDNAクローニングの結果、4,536アミノ酸残基のコード領域を含む15.5kbpの塩基配列が決定された。演繹アミノ酸配列のモチーフ構造を解析したところ、キナーゼドメインのほかフィブロネクチン様モチーフとイムノグロブリン様モチーフの繰り返し構造が明らかになった。リン酸化ペプチドD1およびD2は、それぞれN末端から873-889および4,114-4,123残基に位置した。さらに、ABRMからカルポニン様タンパク質を発見し、本タンパク質がABRMアクトミオシンのMg^<2+>-ATPase活性を阻害すること、また、twitchinのリン酸化部位に結合することを明らかにした。

Two shell tendons (open tendons) are in low production and consumption for a long time, and the famous researchers have pointed out that they are not clear for more than 50 years. Recently, the applicant has discovered that the molecular weight of 7,000,000 or more in the muscle cells of the two shells has been increased. In this study, the structure and functional characteristics of twitchins were clarified by means of genetic engineering. The A, B, C, D, E, E, F, F In addition, the amino acid sequence of RPSLVDVIPDQPTLQHR and RPSMSPAPEV was determined by the amino acid sequence of RPSLVDVIPDQPTLQHR and RPSLVDVIPDQPTLQHR. It's time for you to go to bed. In addition, the results of cDNA sequencing showed that 4,536 amino acid residues were identified in the region containing 15.5 kbp amino acid residues. Deduction of acid configuration of the structure of the analysis of the first, second, third, fourth, fourth The N-terminal residues of D1 and D2 are 873-889 and 4,114-4,123. In addition, ABRM can inhibit the activity of Mg ^<2 +>-ATPase in the presence of ABRM, and can inhibit the activity of Mg^<2+>-ATPase in the presence of ABRM, and can inhibit the activity of Mg ^<2+>-ATPase in the presence of ABRM.

项目成果

Daisuke Funabara et al.: "Phosphorylation of molluscan twitchin by the cAMP-dependent protein kinase"Biochemistry. (印刷中). (2001)

Daisuke Funabara 等人：“cAMP 依赖性蛋白激酶对软体动物抽搐的磷酸化”生物化学（出版中）。

Daisuke Funabara et al.: "A novel 45 kDa calponin-like protein from molluscan catch muscle inhibits actomyosin Mg^<2+>-ATPase activity"Fisheries Sci.. (印刷中). (2001)

Daisuke Funabara 等人：“来自软体动物捕获肌肉的新型 45 kDa 钙调蛋白样蛋白抑制肌动球蛋白 Mg 2+ -ATP 酶活性”渔业科学（2001 年）。