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動物プランクトンの内分泌系に関する分子生物学的研究

浮游动物内分泌系统的分子生物学研究

基本信息

批准号：
05F05207
负责人：
渡部終五
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

最近の研究から、ある種の動物プランクトンには高等動物と同様の内分泌系が存在することが示唆されている。したがって、環境ホルモンは動物プランクトンの生殖機能に影響を及ぼしている可能性があり、その評価法の確立は急務である。本研究は、シオミズツボワムシをモデルとして、未だ全容が明らかでない動物プランクトンの内分泌系に関する基礎的な知見を得ることを目的とした。本年度もシオミズツボワムシBrachionus plicatilis石川株を対象に大量培養を行った。本株ワムシは単為生殖で増殖することでクローン化された個体が得られ、遺伝子解析には好都合である。また、仔虫の産出率も高く、内分泌系の研究にも有用である。上記のように培養したシオミズツボワムシから全RNAを調製し、市販のキットを用い1st strand DNAを合成した。次に長崎大学の萩原博士らのグループがシオミズツボワムシのEST解析で得たgamma-aminobutyric acid(GABA)受容体関連タンパク質(GABARAP)の一部領域をコードしていると想定されるDNA配列を参照してプライマーを設計し、上記のようにして合成した1st strand DNAを鋳型に目的遺伝子の増幅を行った。その結果、GABARAP1およびGABARAP2をコードする2種類の遺伝子を得ることができた。さらにその内部配列を参照にプライマーを設計し、市販の3'-および5'-RACEキットを用いて目的遺伝子の全長を決定してアミノ酸配列を演繹したところ、両受容体のアミノ酸同一率は53%であった。次に、GABARAP1およびGABARAP2のそれぞれ、合成ペプチドおよび組換えDNA発現タンパク質を抗原としてウサギ抗血清を作製した。この抗体を用いてワムシ個体中の組織分布を調べたところ、GABARAP1およびGABARAP2はいずれも中枢神経および末梢神経に広範囲に分布することが明らかになった。以上の結果は、GABARAP1およびGABARAP2がGABA受容体の細胞内輸送に重要な働きを果たしているのみでなく、その他の代謝機構にも重要であることを示唆するものである。

Recent studies have shown the existence of endocrine systems in higher animals and in many species. The impact of environmental factors on the reproductive function of animals and the possibility of their evaluation are urgent. The purpose of this study is to understand the relationship between the endocrine system of animals and the environment. This year's production of Brachionus plicatilis was carried out in large quantities. This plant is a reproductive plant. It is an individual plant. It is a hybrid plant. The yield of larvae is high, and the endocrine system is useful for research. In this paper, we describe the synthesis of 1st strand DNA in culture. Nagasaki University, Nagasaki University, Japan, 1st strand DNA, 1st strand DNA, 1st strand GABARAP1 and GABARAP2 are two types of genetic material. The total length of the target cell is determined by the internal configuration of the cell, and the identity of the cell is 53%. GABARAP1 and GABARAP2 were synthesized and antisera were prepared. The distribution of these antibodies in the tissues of individuals is modulated by the presence of GABARAP1 and GABARAP2 in the central and peripheral nervous systems. These results indicate that GABARAP1 and GABARAP2 are important for intracellular transport of GABA receptors and other metabolic mechanisms.