NK細胞白血病/リンパ腫の増殖機序と増殖抑制に関する研究

NK细胞白血病/淋巴瘤生长机制及生长抑制研究

• 批准号: 12877159
• 负责人: 原田 実根
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University (2001)Okayama University (2000)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877159/
• 关键词: NK細胞リンパ腫; 鼻腔原発; エプスタイン・バーウィルス(EBV); latent membrane protein1; アポトーシス; 薬剤耐性; P糖蛋白; NKリンパ種; Epstein-Barr virus(EBV); NK細胞; LMP-1; Bcl-2

NK細胞白血病/リンパ腫の増殖機序と増殖抑制を検討するため、まず鼻腔原発NK細胞リンパ腫の白血病化症例から細胞株(NK-YS)を樹立した。本細胞株は形態的には大顆粒状リンパ球で表現型はCD2^+、CD3^-、CD5^+、CD7^+、CD16^-、CD56^+、CD57^-であり、EBウイルス(EBV)の感染は2型潜伏感染を示し、NK細胞白血病/リンパ腫に特徴的な形質を保持していた。EBVでコードされたlatent membrane protein1(LMP-1)はEBV感染B細胞の不死化に必須であり、アポトーシスによる細胞死を妨げるアポトーシス抑制分子であるBcl-2の発現を誘導する。そこでLMP-1に対するアンチセンス・オリゴデオキシ核酸(AS-Oligo)の影響を2つのNK細胞リンパ腫細胞株(NK-YSとYT)細胞で検討したところ、AS-OligoはNK-YSおよびYTにおけるLMP-1mRNAや蛋白の発現をEBVで変換したB細胞株(CMG-1)と同様に抑制した。一方、細胞増殖、アポトーシス誘導、Bcl-2発現はCMG-1では抑制されたが、NK-YSおよびYTではこのような抑制は観察されなかった。これらの成績は、EBV陽性NK細胞リンパ腫では増殖、アポトーシスやBcl-2発現の抑制がEBV変換B細胞株とは異なり、LMP-1による直接的な制御を受けておらず、他のシグナル伝達システムを介することが示唆される。次にNK-YSを用いてアポトーシス誘導およびP糖蛋白(Pg-P)の発現を検討した。NK-YSはアポトーシス誘導薬剤であるetoposide(ETP)やdoxorubicin(DNR)に抵抗性を示し、Bcl-2およびP-gPを発現したが、p53は見られなかった。そこで、P-qp拮抗剤であるcyclosporinA(CsA)を培養系に添加すると、CsA+ETPやCsA+DNRはアポトーシスによる細胞死を誘導した。これらの成績はP-gpを介する薬剤耐性がNK-YSの薬剤耐性の基本的な機序であり、抗癌剤とCsAの併用は鼻腔原発NK細胞リンパ腫白血病の治療に有用であることを示唆する。

NK Cell Leukemia/Leukemia Growth Mechanism and Growth Inhibition Study and Establishment of Nasal Pathogen NK Cell Leukemia Cell Line (NK-YS) The cell line morphologically changes from large granular cells to CD2^+, CD3^-, CD5^+, CD7^+, CD16^-, CD56^+, CD57^-, EB virus (EBV) infection to latent type 2 infection, and maintains the characteristics of NK cell leukemia/leukaemia. EBV is a latent membrane protein1(LMP-1) that is essential for the immortality of EBV-infected B cells and induces the expression of Bcl-2. The expression of LMP-1mRNA and protein in NK cell lines (NK-YS and YT) and EBV in B cell lines (CMG-1) was also inhibited by AS-Oligo. One side, cell proliferation, apoptosis induction, Bcl-2 expression, CMG-1 inhibition, NK-YS inhibition, YT inhibition These results include EBV positive NK cell proliferation, loss of protein and inhibition of Bcl-2 production, direct control of EBV B cell lines, and LMP-1 expression. The development of NK-YS protein and P-glycoprotein (Pg-P) is discussed. NK-YS is resistant to etoposide(ETP) and doxorubicin(DNR), and p53 is resistant to Bcl-2 and P-gp. Cell death was induced by the addition of cyclosporin A (CsA), a P-qp antagonist, and CsA+ETP or DNR. The results show that the basic mechanism of NK-YS drug resistance mediated by P-gp and the combination of anti-cancer agents and CsA are useful in the treatment of leukemia.

项目成果

Nakase K, Harada M. et al.: "Dominant negative isoform of the Ikaros gene in patients with adult B-cell acute lymphoblastic leukemia"Cancer Res.. 60. 4062-4065 (2000)

Nakase K、Harada M. 等人：“成人 B 细胞急性淋巴细胞白血病患者中 Ikaros 基因的显性阴性亚型”Cancer Res.. 60. 4062-4065 (2000)

Noguchi T,Harada M, et al: "Antisense oligodeoxynucleotides to LMP-1 induces growth inhibition, apoptosis and Bcl-2 suppression in Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B-lymphoblastoid cells, but not in EBV-positive NK cell lymphoma cells."Br J Haematol.

Noguchi T、Harada M 等人：“LMP-1 反义寡脱氧核苷酸可诱导 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 转化的 B 淋巴母细胞的生长抑制、细胞凋亡和 Bcl-2 抑制，但不会诱导 EBV 阳性 NK 细胞淋巴瘤

Fujii N, Harada M, et al.: "Expression of minor histompatibility antigen, HA-1, in solid tumor cells"Transplantation. (In press).

Fujii N、Harada M 等人：“实体瘤细胞中次要组织相容性抗原 HA-1 的表达”移植。

Matuo K,Harada M, et al: "Hospital capacity and post-transplant survival after allogeneic bone marrow transplantation : analysis of data from the Japan Society for Hematopoietic Cell Transplantation."Bone Marrow Transplant. 26. 1061-1067 (2000)

Matuo K、Harada M 等人：“同种异体骨髓移植后的医院容量和移植后存活率：日本造血细胞移植学会数据分析。”骨髓移植。

Noguchi T, Harada M, et al.: "Antisense oligodeoxymucleotides to latent membrane protein 1 induce growth inhibition, apoptosis and Bcl-2 suppression in Epstein-Barr virus(EBV)-positive natural killer cell lymphoma cells"Br J Hematol. 114. 84-92 (2001)

Noguchi T、Harada M 等人：“潜伏膜蛋白 1 的反义寡脱氧核苷酸可诱导 Epstein-Barr 病毒 (EBV) 阳性自然杀伤细胞淋巴瘤细胞的生长抑制、细胞凋亡和 Bcl-2 抑制”Br J Hematol。