哺乳類におけるフェロモン情報伝達の分子メカニズム

哺乳动物信息素信号传导的分子机制

• 批准号: 01J04643
• 负责人: 佐藤 元康
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01J04643/
• 关键词: フェロモン; Gタンパク質共役型受容体; 受容体; 分子生物学

陸生哺乳動物の多くはニオイ情報の受容のために2つの感覚受容器を備えている。そのうち生殖生理に関わる個体間のコミュニケーションには鋤鼻器と呼ばれるフェロモン受容器官が関与しており、ここに発現するフェロモン受容体がニオイ情報を受容していると想定されている。そこで、本研究ではマウス鋤鼻器のフェロモン応答性を調べた。前年度までの研究により成雌マウスの鋤鼻器を急性に摘出し、これらの細胞のフェロモン応答を検出する実験系を確立した。また、マウス尿中に含まれている微量の脂溶性成分を用いて鋤鼻器神経細胞のカルシウム応答性を検討したところ、いくつかの成分が神経細胞内のカルシウム濃度の上昇を引き起こすことが明らかとなった。しかしながらこの系では特定のリガンドに対する受容体遺伝子の同定は困難であることが確かめられたため、培養細胞における受容体遺伝子の一過性発現を試みたが発現量は微量でありその後の解析には不十分であった。そこで上記の現象について生化学的な解析を可能にするため培養細胞へフェロモン受容体を安定に発現させる系を確立した。ウェスタンブロッティングにより目的タンパク質の発現を確認し、受容体タンパク質へ導入したエピトープタグに対する免疫沈降を試みたところ小胞体シャペロン分子であるカルネキシンと共沈することが明かとなった。この結果は通常の培養細胞系ではフェロモン受容体が細胞膜にターゲットされないことと関連をもつものと考えられる。以上の結果を踏まえて、これら安定発現細胞株を用いた受容体タンパク質の分解経路の解析やcAMP動態などの機能的な解析をおこなっている。

Terrestrial mammals の多くはニオイInformation のReceived のために2 つのSense覚Received container を备えている. Reproductive physiology and reproductive physiology between individuals The clearance and the information of the しており and the ここに発 appear するフェロモンReceived body がニオイinformation しているとscenario されている.そこで、This study is a ではマウスhoe nose device のフェロモン応responding nature を Adjustment べた. The previous year's research on the female nose was done with acute removal of the nasal organ,これらの片のフェロモン応 Answer を検出する実験式をEstablishmentした. There is a trace amount of fat-soluble components in the urine of また and マウス, and the いてhoe is used to control the response of the nasal organ nerve cells to を検. The concentration of したところ and いくつかの神経in the cell has increased and the concentration has increased. The specific のリガンドに対する Acceptance The body remains the same as the child. It is difficult to determine the difficulty and the difficulty is correct. Cultured cells can be used to analyze the transient symptoms of the receptors and the current amount of the cells. It is possible to analyze and analyze the phenomenon mentioned above in biochemistry, to culture cells, and to stabilize and establish the system.ウェスタンブロッティングによりpurpose タンパク性の発Confirmation is now in place, and the quality of the recipient has been imported into the system. Immune sedimentation test子であるカルネキシンと同生することが明かとなった.このRESULTS はNormal cultured cell lines ではフェロモン receptor がcell membraneにターゲットされないこととrelated をもつものと卡えられる. The above results show that the cell lines used in the stable and stable cell lines are made of the same receptor material.のANALYSIS をおこなっている of cAMP dynamic などの function.