3` mRNA-Prozessierung und Transkriptstabilität in Mitochondrien Höherer Pflanzen

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In dem Projekt sollen die 3'-mRNA-Prozessierung und die damit verbundene Transkriptstabilisierung bzw. -degradierung in Mitochondrien höherer Pflanzen untersucht werden. Ausgehend von einem im ersten Antragszeitraum etablierten in vitro Prozessierungssystem sollen die am mRNA-Metabolismus beteiligten Ribonukleasen detailliert charakterisiert werden. dabei soll untersucht werden, ob und inwieweit endo- bzw. exoribonukleolytische Aktivitäten an der 3'-mRNA-Prozessierung bzw. Degradierung beteiligt sind. Ferner sollen die funktionellen Bereiche der als Prozessierungs- bzw. Stabilisierungselemente dienenden Haarnadelstrukturen ("Stem-Loops") identifiziert werden. In diesem Zusammenhang soll geklärt werden, ob in Mitochondrien die Polyadenylierung von mRNAs beteiligt ist. Zur Identifizierung der am RNA-Metabolismus beteiligten Komponenten soll die Funktion einer potentiellen mitochondrialen RNA-Helikase sowohl in vitro als auch in vivo untersucht werden. Ausgehend von diesem Protein sollen über "Two-Hybrid"-Interaktionen, aber auch über "Epitope-Tagging" in transgenen Pflanzen weitere Komponenten des pflanzenmitochondrialen mRNA-Prozessierungsapparates bzw. -degradierungsapparates identifiziert und charakterisiert werden.