発生過程にある大脳皮質内の細胞動態の観察

发育过程中大脑皮层内细胞动态的观察

• 批准号: 13035020
• 负责人: 玉巻 伸章
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13035020/
• 关键词: 放射線グリア; 神経幹細胞; 大脳皮質; 細胞移動; cre-loxP

近年、神経幹細胞の再生医療における有効利用の可能性が大きく取り上げられているが、神経幹細胞の実態は霧の中にある。何故解き明かせ法いのか?理由の多くは、発生期にある大脳皮質の細胞を、成体内で観察する方法論の欠如にあった。本研究では、膜移行標識を付けたGFPを胎児大脳皮質でも高い効率で発現する組替えアデノウイルスを作り、蛍光のみならず免疫組織科学法によって感度高く検出することにより、神経幹細胞の実態は放射状グリア(radial glia)であることを解き明かした。更に、はじめは膜移行標識を付けたサンゴ蛍光蛋白、DsRedやhrGFPを発現するが、cre recommbinaseを発現する細胞や発生の段階で発現し始めたときにのみ膜移行標識を付けたGFPを発現するように工夫した組替えアデノウイルスを作成した。このアデノウイルスを、神経分化の過程を調節するbHLH遺伝子転写調節遺伝子NEXのプロモーターの下流にcreのcDNAをつないだNEX-cre knock-inマウスに感染させることにより、放射状グリアが大脳皮質神経細胞を生み出す際の挙動も観察できるようになった。その結果、脳室帯で分裂能を持つ細胞は放射状グリアのみで、不等分裂の再に放射状線維は神経細胞に受げ継がれることを確認した。この放射状線維は、神経細胞が脳室下帯に滞留後、接線方向に移動する際には消失するが、放射方向に移動を続ける際にはそのまま残存しつづけた。

In recent years, the possibility of using neural stem cells for regenerative medicine has increased, and the status of neural stem cells has changed. Why is it so difficult to understand the law? There are many reasons for this, and the methodology for the investigation of large cortical cells in vivo and in vivo is incomplete. In this study, the membrane transition marker GFP was detected at a high rate in the fetal cortex, and the tissue was identified by light and immunohistological methods. In addition, we have worked hard to create a combination of photoproteins, DsRed, and hrGFP that are associated with membrane migration markers, and cells and stages of development that are associated with cre recommbinase. This gene regulates the process of neuronal differentiation. The cDNA of NEX gene regulates the process of neuronal differentiation. The cDNA of nex gene regulates the process of neuronal differentiation. The cDNA of nex gene regulates the process of neuronal differentiation. As a result, it is confirmed that the cells in the cell division are radially divided and that the cells in the cell division are radially divided. The radial dimension of the neuron remains in the lower part of the chamber, disappears when the connection direction moves, and remains when the radial direction moves.

项目成果

Furuta T: "In vivo transduction of central neurons using recombinant sindbis virus : Goli-like labeling of dendrites and axons with membrane-targeted fluorescent proteins"J Histochem Cytochem. 49. 1497-1508 (2002)

Furuta T：“使用重组辛德比斯病毒体内转导中枢神经元：用膜靶向荧光蛋白对树突和轴突进行 Goli 样标记”J Histochem Cytochem。

Tamamaki N: "Radial glia is a progenitor of neocortieal neurons in the developing cerebral cortex"Neurosci. Res.. 41. 51-60 (2001)

Tamamaki N：“放射状胶质细胞是发育中的大脑皮层中新皮质神经元的祖细胞”Neurosci。

Tamamaki N: "Radial glias and radial fibers : What is the function of radial fibers?"Anatomical Sci. International. 77. 9-17 (2002)

Tamamaki N：“径向胶质细胞和径向纤维：径向纤维的功能是什么？”解剖科学。

Tamamaki N: "Response : Glial cell migration directed by axon guidance cues"Trends in Neurosci.. 25. 175-176 (2002)

Tamamaki N：“响应：由轴突引导线索引导的神经胶质细胞迁移”神经科学趋势.. 25. 175-176 (2002)

Fujimori K: "Differential localization of high-and low-molecular-weight variants of MAP2 in the developing rat telencephalon"J. Comp. Neurol.. (in press). (2002)

Fujimori K：“MAP2 高分子量和低分子量变体在发育中的大鼠端脑中的差异定位”J.