大脳皮質神経細胞多様性出現のメカニズムをショウジョウバエに学ぶ

了解果蝇大脑皮层神经元多样性出现的机制

• 批准号: 18021030
• 负责人: 玉巻 伸章
• 金额: $ 4.99万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18021030/
• 关键词: Single-cell RT-PCR; single-cell Microarray analysis; GABA神経細胞; 希突起膠細胞; 大脳皮質; 前駆細胞; Single-cell Microarray analysis

ショウジョウバエの一部の神経細胞系譜には、局所介在神経細胞と神経細胞を包むsub-pefineurialgliaが2:1ぐらいの比率で出現するものがあることが知られている。このような記述は、マウス大脳皮質の抑制性(GABA)神経細胞と髄鞘を形成するオリゴデンドロサイトの起源が同じ内側基底核原基にあることを思い起こさせる。GABA神経細胞とオリゴデンドロサイトを生み出す神経幹細胞は、脳室下帯を接線方向に移動して新たに分裂を繰り返してGABA神経細胞やオリゴデンドロサイトを生み出す可能性を考えた。このような可能性を確かめるため、我々はGFP陽性GABA神経前駆細胞をE18 GAD67-GFP knock-in mouse胎仔の大脳新皮質脳室下帯より得て、蛋白分解酵素処理により単一細胞に分散して遺伝子発現を調べた。分散したGFP陽性細胞でsingle-cell RT-PCRを行なうと、確かにMAP2とKi67を共発現する細胞が見つかる。また、同時にオリゴデンドロサイトマーカーを検出すると、2割弱の細胞でNG2,PLP,MBPなどが検出された。さらに、単一GFP陽性細胞から得たtotal RNAを増幅してsingle-cellmicroarray analysisを行うと、NG2,PLP,MBPがプレゼントコールとなる細胞があった。検出されたmRNAが、実際に蛋白として発現しているかどうかを免疫細胞化学法で調べると、NG2,PLP,MBPが2割弱程度の細胞で発現も確認された。それゆえGFP陽性GABA神経前駆細胞ではニューロンマーカーとグリアマーカーが共存していることになる。我々は、この時期の一部のGFP陽性細胞は、GABA神経細胞とオリゴデンドロサイトを生み出せる共通の前駆細胞であると考えた。

A part of the neurocyte pedigree appears in a ratio of 2:1 between neurocytes and neurocytes. This paper describes the origin of inhibitory (GABA) neurons in the cortex and their sheath formation, as well as the origin of the medial basal nucleus. GABA cells are divided into two groups: the first group and the second group. This possibility is confirmed by the fact that GFP positive GABA neurons in E18 GAD67-GFP knock-in mouse fetal neocortical cells are isolated and proteolytic enzymes are processed in a single cell to modulate gene development. Single cell RT-PCR was performed on scattered GFP positive cells, and MAP2 and Ki67 were detected on isolated cells. 2. Cut the weak cells of NG2, PLP, MBP and detect them. In addition, the total RNA of GFP positive cells was increased by single-cell microarray analysis. NG2, PLP and MBP were also increased. The expression of mRNA and protein was confirmed by immunocytochemical method. The expression of NG2, PLP and MBP was confirmed by cell detection. GFP-positive cells in the brain are blue. Some of the GFP positive cells in this study were GABA neurons.

项目成果

大脳皮質nNOS陽性GABA神経細胞の機能の研究法

研究大脑皮层 nNOS 阳性 GABA 神经元功能的方法

• 发表时间: 2008
• 作者: Watanabe;S.;Blaisdell;A.;Huber;L.;Young;A.(編集);Tanahira C;I de Y;Kaneko K;Yamamoto E;Huang J;Basu K;Esumi S;Eiichiro Yamamoto;Basu K.;Esumi S.;Higo S.;Higo S.;Huang J.;玉巻 伸章
• 通讯作者: 玉巻 伸章

Novel strategy to selectively label excitatory and inhibitory neurons in the cerebral cortex of mice

• DOI: 10.1016/j.jneumeth.2008.01.016
• 发表时间: 2008-05-30
• 期刊: JOURNAL OF NEUROSCIENCE METHODS
• 影响因子: 3
• 作者: Basu, Kaustuv;Gravel, Claude;Sik, Attila
• 通讯作者: Sik, Attila

ドーパミン神経細胞の分離法

多巴胺能神经元的分离方法

• 发表时间: 2007

Excess Salt Causes Cerebral Neuronal Apoptosis and Inflammation in Stroke-Prone Hypertensive Rats Through Angiotensin II-Induced NADPH Oxidase Activation

• DOI: 10.1161/strokeaha.108.517284
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: STROKE
• 影响因子: 8.3
• 作者: Yamamoto, Eiichiro;Tamamaki, Nobuaki;Kim-Mitsuyama, Shokei
• 通讯作者: Kim-Mitsuyama, Shokei

Dorsally derived netrin 1 provides an inhibitory cue and elaborates the ;waiting period' for primary sensory axons

背侧衍生的 netrin 1 提供抑制信号并详细说明初级感觉轴突的“等待期”

• 发表时间: 2006
• 期刊: Development 133
• 作者: Higo S;Udaka N;Tamamaki N;Mami Matsuo-Takasaki;Higo et al.;Watanabe et al.
• 通讯作者: Watanabe et al.