四肢パターン形成におけるBMP,Wntシグナリングの役割

BMP 和 Wnt 信号在肢体模式形成中的作用

• 批准号: 13045049
• 负责人: 濃野 勉
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kawasaki Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13045049/
• 关键词: Wnt-3a; Wnt-10a; beta-catenin; AER; FGF-8; マウス胚; ニワトリ胚; 四肢形成

四肢の発生にはAER形成が重要で,そのAER形成にはbeta-cateninを介したWntシグナリングが関与している。ニワトリ胚予定肢芽領域にマウスWnt-3aを過剰発現させる実験で異所的なAERが形成されることが報告されているが,我々のこれまでの実験ではニワトリWnt-3aを過剰発現させても異所的なAERは誘導されない。このことは,同じWnt-3aでもニワトリとマウスで活性が異なることを意味し,Wnt-3a以外のWnt遺伝子が真のAER誘導因子として機能していると考えられる。AERで発現しているWnt遺伝子の中でWnt-10aに注目しクローニングを試みたが,現時点では5'側数十塩基を残したところで中断し,全長の単離には至っていない。そこで,すでに同定されているマウスWnt-10aを用いて欠けているアミノ酸を補い,Wnt-10aのAER形成における機能を類推した。アミノ末端側43アミノ酸がマウスに由来するmgWnt-10aは予定肢芽領域での強制発現により異所的なFGF-8の発現を誘導した。従って,Wnt-10aがニワトリでもマウスでもAERの誘導に関与していると考えられる。ニワトリとマウスのWnt-3aを強制発現させたときの表現型が異なっていたことから,アミノ酸配列の大きく異なるN末端側のドメインスワッピングを行い,AER形成において必須の領域の特定を試みた。結果は予想に反し,N末端側24残基がマウスに由来するmgWnt-3aでは異所的なAERを誘導できなかった。マウスWnt-3aで誘導される異所的なFGF-8の発現には,シグナル配列を含むN末端側の残基だけでなく,マウスとニワトリ間で比較的保存されている残りの領域が必須であること,すなわち保存されている領域のわずかな配列の違いによってWnt-3aの活性が異なることが確認された。

The development of limbs is important for AER formation, and all AER formation is related to beta-catenin. Wnt-3a was detected in the pre-determined bud domain and AER was induced in the pre-determined bud domain. Wnt-3a is the same as Wnt-3a, and Wnt-3a is the same as Wnt-3a. Wnt-3a is the same as Wnt-3a. AER was found in the middle of Wnt gene, Wnt-10a was observed in the middle of Wnt gene, and the current point was 5'side of Wnt gene. In addition, Wnt-10a can also be used as an AER. mg Wnt-10a induced the expression of FGF-8 under stress in a given bud field. Wnt-10a is the first to be tested for AER. Wnt-3a stress expression of AER is required for domain specific test in AER formation. The results showed that the N-terminal 24 residues were induced by MgWnt-3a. The expression of FGF-8 in Wnt-3a induced heterozygous site was confirmed by comparing the sequence of residues on the N-terminal side of Wnt-3a with the sequence of residues on the N-terminal side.

项目成果

Yamagishi, T., Nakajima, Y., Nishimatsu, S., et al.: "Expression of bone morphogenetic protein-5 gene during chick heart development : possible roles in valvuloseptal endocardial cushion formation"Anatomical Record. 264. 313-316 (2001)

Yamagishi, T.、Nakajima, Y.、Nishimatsu, S. 等人：“鸡心脏发育过程中骨形态发生蛋白 5 基因的表达：在瓣膜间隔心内膜垫形成中的可能作用”解剖记录。

Yasue, A., Tao, H., Nohno, T., et al.: "Cloning and expression of the chick p63 gene"Mechanisms of Development. 100. 105-108 (2001)

Yasue, A.、Tao, H.、Nohno, T. 等：“小鸡 p63 基因的克隆和表达”发育机制。

Kano, Y., Nohno, T., Takahashi, R., et al.: "cAMP and calcium ionophore induce outgrowth of neuronal processes in PC12 mutant cells in which nerve growth factor-induced outgrowth of neuronal processes is impaired"Neuroscience Letters. 303. 21-24 (2001)

Kano, Y.、Nohno, T.、Takahashi, R.等人：“cAMP 和钙离子载体诱导 PC12 突变细胞中神经元突起的生长，其中神经生长因子诱导的神经元突起的生长受到损害”《神经科学快报》。

Wada, N., Nohno, T.: "Differential response of Shh expression between chick forelimb and hindlimb buds by FGF-4"Developmental Dynamics. 221. 402-411 (2001)

Wada, N.，Nohno, T.：“FGF-4 对小鸡前肢和后肢芽之间 Shh 表达的差异反应”发育动力学。