ショウジョウバエの遺伝学的スクリーニングによるシナプス局在蛋白質の網羅的同定

通过果蝇基因筛选全面鉴定突触定位蛋白

• 批准号: 13202026
• 负责人: 星野 幹雄
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202026/
• 关键词: ゲノム; 遺伝学; 脳神経; 神経科学; シナプス; 分子生物学; ショウジョウバエ; 行動

シナプスに関わる諸問題の抜本的解決のためには、シナプスに局在する因子の同定と機能解析が不可欠である。しかしながら、全ゲノムの塩基配列が解読されても、遺伝子産物の神経細胞内における局在部位を指標にした網羅的なスクリーニングは容易ではない。本研究では、全く新しいアプローチとして、ショウジョウバエの遺伝学を用いてシナプスに局在する機能分子を網羅的にスクリーニングする。具体的には、シナプスに局在し、欠損変異体で行動異常を引き起こす、ショウジョウバエのHIGおよびSIF蛋白質の性質を利用する。本年度の実績としては、スクリーニングの準備段階として、HIG蛋白質のドメイン解析を行った。その結果、HIG蛋白質においては、第一補体結合ドメインが蛹中期におけるシナプスへの輸送のシグナルを含むのに対し、higの変異表現型をレスキューするためには、N末端部分を蛹中期に発現させることが必要十分であることがわかった。以上の結果から、HIG蛋白質上において局在シグナルとレスキュー能が分離可能であるということがわかり、その結果として、第一補体結合ドメインを欠く改変HIG蛋白質を、ゲノム上のシナプス局在因子をスクリーニングするためのツールとして用いることができるということが明らかになった。現在、この改変HIG蛋白質を用いたエクソントラップベクターを作成中であり、これを用いてシナプス局在因子を網羅的にスクリーニングすることによって、シナプスの諸問題にゲノム生物学的な視野からアプローチしていくことを目指す。

The solution of the problem is the same as the function analysis of the problem. The gene sequence of the gene products in the brain cells is easy to change. The gene sequence of the gene products is easy to change. This study is entirely new to the study of molecular biology and its application in the study of functional molecules. The specific characteristics of HIG and SIF proteins are discussed in detail. This year's performance is in the process of preparation for HIG protein analysis. As a result, HIG protein is expressed in mid-pupa, mid-pupa, and mid-pupa in the N-terminal region. The above results show that HIG protein can be separated from other proteins by the first complement fixation factor, and HIG protein can be separated by the first complement fixation factor. Now, this modified HIG protein can be used in the production of protein, protein and protein, and it can be used in the production of protein and protein.

项目成果

Masato Yoshizawa et al.: "Expression of stef, an activator of Rac1 correlates with the stages of newround morphological development in the mouse brain"Mechanism of Development. (in press).

Masato Yoshizawa 等人：“Rac1 激活剂 stef 的表达与小鼠大脑新一轮形态发育阶段相关”发育机制。

Naoki, Matsuo et al.: "Caracterization of STEF a guanine nucleotide exchange factor for Rac1, required for neurite growth"Journal of Biological Chemistry. 277. 2860-2868 (2002)

Naoki、Matsuo 等人：“STEF 的表征，它是神经突生长所需的 Rac1 的鸟嘌呤核苷酸交换因子”《生物化学杂志》。