使用大肠杆菌分析真核离子转运膜蛋白-猫眼课题宝

使用大肠杆菌分析真核离子转运膜蛋白

批准号：

13206032

负责人：

魚住信之

金额：

$2.69万

依托单位：

Nagoya University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)

财政年份：

2001

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2001 至 2002

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206032/

关键词：

トポロジー膜貫通イオン透過孔大腸菌発現系糖鎖 AtKUP1 AtHKT1 Ktr

项目摘要

项目成果

魚住信之的其他基金

相似基金

相关文献

中文摘要

翻译

点击翻译按钮获取中文摘要

英文摘要

(1)AtKUP1(KUP系)のトポロジーを大腸菌発現系を用いて決定したところ、意外にも4回膜貫通構造であった。(疎水領域は13カ所存在する)。次にこの結果の真偽を検証し、大腸菌の発現系の有効性を評価するために、検証の必要な箇所をイヌの膜小胞や動物細胞HEK293を宿主とする発現系を用いた糖鎖修飾実験を行い大腸菌の結果と比較した。その結果、大腸菌発現系と異なる結果が得られた貫通領域が見つかった。(2)HKT系(AtHKT1)のトポロジーから推定されるイオン透過孔に存在する特徴的なアミノ酸を置換し、Na^+とK^+の選択部位を決定したところ、AtHKT1のSer68とMet69がGly-Leuに変換されることにより、K^+透過選択性に変わることが明らかとなった。Na^+とK^+の選択部位の決定は本輸送系の本質的でアイデアルばかりではなく、あらゆるK^+の輸送系に必須のイオン選択孔の構造の一般化に重要な知見となる。(3)Synechocystis sp. PCC6803のKtr系を大腸菌に発現させて解析したところ、KtrABCの3つのサブユニットでK^+の輸送を行うことを明らかにした。またNa^+によって輸送活性が大きくなることを示した。(4)K^+チャネル(KAT1)の親水性膜貫通領域はpost-translationalに小胞体膜に挿入されることを示し、以前の大腸菌で得られた結果と一致した。親水性膜貫通領域は隣の親水性膜貫通領域と相互作用をして生体膜に移行することがあることを見出した。(5)植物にも存在する細菌Na^+/H^+antiporterの膜貫通領域に存在するAspはH^+の透過には関与するがNa^+の透過には関与しないことを示した。

期刊论文(5)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

魚住信之: "化学と生物(植物のK^+チャネル・K^+トランスポーターはどこまでわかったか)"5 (2001)

鱼住伸行：“化学与生物学（我们对植物中的 K^+ 通道和 K^+ 转运蛋白了解多少）”5 (2001)

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Sato et al.: "Integration of Shaker-type K^+ channel, KAT1 into the endoplasmic reticulum membrane : Synergistic insertion of voltage sensing segments, S3-S4 and independent insertion of pore-forming segments, S5-P-S6"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 99. 60-65 (20

Sato 等人：“Shaker 型 K^ 通道、KAT1 整合到内质网膜中：电压传感片段 S3-S4 的协同插入和成孔片段 S5-P-S6 的独立插入”Proc.Natl

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Kato et al.: "Evidence in support of four transmembrane-pore-transmembrane topology model for the Arabidopsis thaliana Na^+/K^+ translocating AtHKT1 protein, a member of the superfamily of K^+ transporters"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 6488-6493 (2001)

Kato 等人：“支持拟南芥 Na^ /K^ 易位 AtHKT1 蛋白（K^ 转运蛋白超家族的成员）的四种跨膜-孔-跨膜拓扑模型的证据”Proc。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Uozumi N.: "Escherichia coli as an expression system for K^+ transport systems from plants"Am.J.Physiol.. 281. C733-C739 (2001)

Uozumi N.：“大肠杆菌作为来自植物的K^转运系统的表达系统”Am.J.Physiol..281.C733-C739(2001)

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

Nakamura et al.: "Residue aspartate-147 from the third transmembrane region of Na^+/H^+ antiporter NhaB of Vibrio aliginolyticus plays a role in its activity"J.Bacteriol. 183. 5762-5757 (2001)

Nakamura 等人：“溶藻弧菌 Na^/H^ 逆向转运蛋白 NhaB 第三跨膜区的残基天冬氨酸 147 在其活性中发挥作用”J.Bacteriol。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

[]

通讯作者：

塩害から種子形成を守るナトリウム輸送体の協奏的機構の探究

批准号：

24H00495
项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
资助金额：

$23.88万
财政年份：

2024
负责人：

魚住信之
依托单位：

Tohoku University

Functional expression system for plant ion transport system in Escherichia. coli

批准号：

21K19060
项目类别：

Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
资助金额：

$4.08万
财政年份：

2021
负责人：

魚住信之
依托单位：

Tohoku University

Study on the molecular mechanism of Ca signaling mediated by plant K channels

批准号：

20KK0127
项目类别：

Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
资助金额：

$11.9万
财政年份：

2020
负责人：

魚住信之
依托单位：

Tohoku University