腫瘍遺伝子治療のための汎用生体エレクトロポレーションシステムの確立

通用型肿瘤基因治疗生物电穿孔系统的建立

• 批准号: 13218059
• 负责人: 村松 達夫
• 金额: $ 3.14万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218059/
• 关键词: 生体エレクトロポレーション; 遺伝子導入; 定電流電源; 定電圧電源; 腫瘍マウス; 肝葉; 腸管膜静脈; GFP

1.生体遺伝子エレクトロポレーションのための定電流電源装置を作製し、実効出力のばらつきについて、従来の定電圧電源装置との比較を正常マウス筋肉と肝臓について行ったところ、遺伝子導入実施範囲内では従来の定電圧装置より、最も導入効率の良いと考えられる30-50ボルト付近における変動係数で約半分程度と小さいことが判明した。2.ルシフェラーゼの発現は実効出力で定電流装置、定電圧装置ともに2.5-4ワット付近で最大となった。しかしながら、定電流装置によっても、ルシフェラーゼ櫃伝子発現自体のばらつきには定電圧装置と比較してこれら両方の組織ともに大幅な減少がみられなかった。従って、遺伝子発現の観点から電流・電圧を同時に制御できる装置の試作が必凄であると考えられた。3.ピンセット型電極と定電流試作装置を用いて肝臓へのDNA導入経路の検討を行った。腸管膜静脈からの導入を試みたところ、GFPレポーター遺伝子発現も広範囲に特に肝葉周辺部に認められた。一方、腫瘍マウスについてはそのほとんどが死亡したが、その原因をつきとめることはできなかった。4)電極については、ゲル電極、アルミ箔電極、おろし金電極、8針電極、湾曲型リード線電極等を試したものの、これらは遺伝子発現が肝葉表面にとどまるか、深部であっても非常に弱い発現しか得ることができず、従来用いているピンセット型電極と比べて大幅な改善はみられなかった。柔軟で圧力をかけながら肝葉をはさむことができるような電極の開発が必要であるものと考えられた。

1. Manufacturer of the constant current power supply device of the biological remains of the body, and the effect of the force is producedばらつきについて, 従来の constant voltage power supply device との comparison を normal マウス Muscle と liver 臓 に つ い て row ったところ, the fixed voltage device of the たところ, the best introduction efficiency of the では従来 in the 実 Shi Fan囲The えられる30-50ボルト Pay close to the における変 coefficient of movement is about half a point and the small さいことが is clear. 2. The current output of the ルシフェラーゼの発 is a constant current device and a constant voltage device with an effective output of 2.5-4 ワット and the maximum voltage is close to the maximum.しかしながら, constant current device によっても, ルシフェラーゼ cabinet 伝子発 appear in the body のばらつきThe constant voltage device has been significantly reduced in comparison with the square structure.従って、缝子発 appear の禳点からcurrent・electrical voltageを Simultaneous control of the できる device and the trial production of it must be sad であるとtest えられた. 3. The Triton type electrode and the constant current trial device are used to introduce the DNA into the path of the electrode. Intestinal membranous veins are introduced into the liver and the liver is inserted into the veins. One side, swelling of the disease マウスについてはそのほとんどが死したが, そのcause of をつきとめることはできなかった. 4) Electrode については, ゲル electrode, アルミ foil electrode, おろし gold electrode, 8-pin electrode The surface of the liver lobe of the pole, curved type リード wire electrode, etc. The surface is very soft and the deep part is very weak The use of the いているピンセット type electrode has greatly improved the はみられなかった compared to the べて. Soft pressure force をかけながら liver leaf をはさむことができるような electrode の开発が であるものと卡えられた.