DNAメチル化を用いた遺伝子診断法による早期診断法の確立

利用DNA甲基化的基因诊断方法建立早期诊断方法

• 批准号: 13218110
• 负责人: 伊東 文生
• 金额: $ 4.74万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13218110/
• 关键词: 消化器癌; メチル化; MCA法; アポトーシス; 潰瘍性大腸炎

MCA(methylated CpG island amplification)法を用いて、大腸癌細胞、膵癌細胞などより、メチル化のターゲット遺伝子の断片を100種類以上単離することに成功した。これらの断片より、プロモーター領域がメチル化することにより発現が低下する新規遺伝子として、カルシウムチャンネルに関連するCACNAIG遺伝子、アポトーシスに関連するHRK遺伝子、細胞周期に関連するCHFR遺伝子などを新規にクローニングすることに成功し得た。これらの遺伝子について、消化器癌細胞および消化器癌組織を用いてDNAメチル化の頻度をCOBRA(Combined bisulfite restriction analysis)法や、我々の開発したbisulfite-SSCP法を用いて検討を行った。いずれの遺伝子も消化器癌において高頻度にメチル化しかつ発現低下も認められること、この結果は種々の遺伝子に高頻度にメチル化を認める腫瘍(CpG island methylator phenotype-CIMP)においてさらに顕著であった。さらに、長期経過例の潰瘍性大腸炎の前癌病変である高度異型上皮において、加齢と共にメチル化の程度が亢進する遺伝子群(p16遺伝子exon1,MYOD遺伝子、ER遺伝子、CSPG2遺伝子)が高頻度にメチル化されていること、また、きわめて興味深いことに高度異型上皮を伴う潰瘍性大腸炎の非腫瘍部粘膜においても高頻度にメチル化していることが明らかになった。

を MCA (methylated CpG island amplification) method with い て, colorectal cancer cells, Cui cancer な ど よ り, メ チ ル change の タ ー ゲ ッ ト posthumous son 伝 の を fragment above 100 species from す 単 る こ と に successful し た. こ れ ら の fragment よ り, プ ロ モ ー タ ー field が メ チ ル change す る こ と に よ り 発 now low が す る new rules but 伝 son と し て, カ ル シ ウ ム チ ャ ン ネ ル に masato even す る CACNAIG heritage 伝, ア ポ ト ー シ ス に masato even す る HRK heritage 伝, cell cycle に masato even す る CHFR heritage 伝 son な ど を new rules に ク ロ ー ニ ン グ す る こ Youdaoplaceholder0 successfully wins た. こ れ ら の posthumous son 伝 に つ い て cancer cells, digester お よ び digesters を cancerous tissues with い て DNA メ チ ル change の frequency を COBRA (Combined bisulfite restriction analysis) method や, I 々 <s:1> developed たbisulfite-SSCP method を use て検 て検 to negotiate を line った. い ず れ の posthumous son 伝 も digesters carcinoma に お い て high frequency に メ チ ル change し か つ 発 now low も recognize め ら れ る こ と, こ の results は 々 の posthumous son 伝 に high frequency に メ チ ル change を recognize め る swollen sores (CpG island methylator phenotype - CIMP) に お い て さ ら に 顕 the で あ っ た. さ ら に, long-term 経 example の ulcerative colitis の before cancer - で あ る highly abnormal epithelial に お い て, 齢 と altogether に メ チ ル mineralization degree of の が hyperthyroidism す る heritage 伝 subgroup (p16 heritage 伝 exon1, MYOD heritage 伝, ER heritage 伝, CSPG2 heritage 伝) が high frequency に メ チ ル change さ れ て い る こ と, ま た, き わ め て tumblers deep い こ と に highly abnormal epithelial を with う ulcerative colitis の not swollen sores of mucosal に お い て も high frequency に メ チ ル change し て い る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

伊東文生: "細胞工学"秀潤社. 7 (2001)

伊藤文雄：《细胞工程》书俊社7 (2001)。

Itoh F: "Aberrant methylation and histone deacetylation of cyclooxy genese 2 in gastric cancer"Int. J. Cancer. 97・3. 272-277 (2002)

Itoh F：“胃癌中环氧基基因 2 的异常甲基化和组蛋白脱乙酰化”Int. Cancer 97・3 (2002)。

Yamamoto H: "Genetic and clinical features of human pancreatic ductal adenocarcinomas with widespread microsatellite instability"Cancer Research. 61・7. 3139-3144 (2001)

Yamamoto H：“具有广泛微卫星不稳定性的人类胰腺导管腺癌的遗传和临床特征”癌症研究 61・7（2001）。

Sasaki Y: "Increased expression of t-fimbrin gene after DNA damage in cho cells and inactivation of t-fimbrin by CPG methylation in human colorectal cancer cells"Int.J.Cancer. 97・2. 211-216 (2002)

Sasaki Y：“cho 细胞中 DNA 损伤后 t-fimbrin 基因的表达增加以及人结直肠癌细胞中 CPG 甲基化导致的 t-fimbrin 失活” Int.J.Cancer 97・2 (2002)。

Kikuchi T: "Regional methylation and histone deacethylation of p57KIP2 associated with Gene silencing in human tumors"Oncogene. (in-press). (2002)

Kikuchi T：“p57KIP2 的区域甲基化和组蛋白脱乙酰化与人类肿瘤中的基因沉默相关”癌基因。