熱帯熱マラリア原虫の細胞内寄生成立における抗酸化酵素系の役割の解明

阐明抗氧化酶系统在恶性疟原虫细胞内寄生虫产生中的作用

• 批准号: 13226137
• 负责人: 河津 信一郎
• 金额: --
• 依托单位: Research Institute, International Medical Center of Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226137/
• 关键词: アンチオキシダント; ペルオキシレドキシン; マラリア; Plasmodium; 遺伝子発現; 宿主寄生体相互関係

熱帯熱マラリア原虫ペルオキシレドキシン(Prx)の生理機能を明らかにする目的で、原虫1-Cys型および2-Cys型Prxの組換え体タンパク質について性状解析をおこなった。その結果、両組換え体Prxに過酸化水素に対する還元活性が認められた。また、2-Cys型Prxにはチオレドキシンペルオキシダーゼ活性が確認された。非還元SDS-PAGEで分離した原虫ライセートを抗Prx抗体とウエスタンブロット法で反応させたところ、2-Cys型Prxはホモダイマーとして検出された。一方、1-Cys型Prxはモノマーとして検出された。このことから、熱帯熱マラリア原虫の2-Cys型Prxは、他生物でのそれと同様に、チオレドキシン系のターミナルペルオキシダーゼとして機能していると推測された。一方、1-Cys型Prxは、チオレドキシン系に拘束されずに独立して機能する酵素と推測された。Prxの赤内型原虫各発育期における発現パターンをウエスタンブロット法で調べたところ、両Prxタンパク質の発現は、原虫での代謝の活性化に一致して栄養体/分裂体期に亢進した。このことから、熱帯熱マラリア原虫は、ヘモグロビン消化等の代謝過程から派生する内因性活性酸素種の消去にPrxを利用していることが推測された。最後に、1-Cys型Prxをマラリア原虫で過剰発現させたところ、クロロキンに対するIC_<50>値が親株のそれより有意に上昇し、1-Cys型Prxがクロロキンの殺原虫作用に何らかの関連を有することが示唆された。クロロキンの殺原虫作用の一つとして、原虫のヘモグロビン代謝系でのヘムの解毒を阻害して細胞内過酸化物を増加させる作用が知られているが、1-Cys型Prx過剰発現原虫ではこの作用が緩和された結果、クロロキンに対する感受性が低下したものと考察された。

In order to clarify the physiological functions of the thermal malaria protozoa Pelokiridokisin (Prx), we will analyze the characteristics of the composition of the protozoa 1-Cys and 2-Cys Prx. As a result, the composition of Prx was changed to that of Prx. 2-Cys type Prx is confirmed to be active. Non-reductive SDS-PAGE separation of protozoa, anti-Prx antibodies, anti-Prx antibodies A square, 1-Cys type Prx is not available. The 2-Cys type Prx of this species is similar to that of other species, and its function is presumed to be similar to that of other species A single, 1-Cys-type Prx is a restriction enzyme that functions independently. The development of protozoa in each development stage of Prx is consistent with the regulation of protozoa, the development of protozoa, and the activation of protozoa metabolism. The metabolic processes of protozoa, protozoa, and protozoa, such as digestion, and the elimination of endogenous active acid species, are presumed. Finally, 1-Cys-type Prx was found to be related to the IC_<50>value of the parent plant. Although the protozoicidal effect of clorocin is known to prevent the detoxification of protozoa's metabolic system and increase intracellular peracidifiers, this effect of 1-Cys-type Prx-overexpressed protozoa has been alleviated. As a result, the susceptibility to clorocin is low.

项目成果

Kawazu, S. et al.: "Molecular characterization of a 2-Cys peroxiredoxin from the human malaria parasite Plasmodium falciparum"Molecular & Biochemical Parasitology. 116. 73-79 (2001)

Kawazu, S. 等人：“来自人类疟原虫恶性疟原虫的 2-Cys 过氧化还原蛋白的分子特征”分子