熱帯熱マラリア原虫の細胞内寄生成立における抗酸化酵素系の役割の解明

阐明抗氧化酶系统在恶性疟原虫细胞内寄生虫产生中的作用

• 批准号: 16017318
• 负责人: 河津 信一郎
• 金额: $ 6.53万
• 依托单位: Research Institute, International Medical Center of Japan
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017318/
• 关键词: 感染症; マラリア; 酵素; ストレス; 発現制御; レドックス; 宿主寄生体相互関係; レドクス

前年度は、Prx遺伝子の転写調節メカニズムを調べる目的で、同遺伝子5'のレポーターアッセイ、ゲルシフトアッセイ、および、クロマチン免疫沈降(ChIP)をおこない、1-Cys型Prx遺伝子の発育期特異的な転写調節に、(1)5'プロモーター領域上のcis-element(enhancer)および、その配列特異的に結合する転写因子(trans-element)が関与すること、また(2)トロホゾイト期特異的な転写活性化には、5'プロモーター領域周囲のヒストンアセチル化が関与することを報告した。今年度は、1-Cys型Prx遺伝子の発育期特異的cis-elementのenhancer活性を確認する目的でその配列を別遺伝子(2-cys型Prx遺伝子)の5'プロモーター配列と交換してレポーターアッセイをおこなった。その結果、同配列のタンデムリピート(1-4回)を2-Cys型Prx遺伝子上流に挿入したプラスミドを用いてアッセイをおこなうと、リピート回数に応じてレポーター活性の亢進がみとめられた。このことから、前回報告した領域が機能的なenhancerであることが検証された。また、このenhancer領域とtrans-elementとの結合様式を詳細に解析する目的でDNase I footprintingをおこなった。その結果3箇所の結合部位が同定された。現在、これらの情報をもとにtrans-element(複合体)の単離・精製を進めている。Epigeneticな機構に関連した取り組みとしては、プロモーター上のヒストンアセチル化に関わる因子の候補としてPfGCN5に着目し、このタンパクに対する抗ペプチド抗体を作製してクロマチン免疫沈降(ChIP)をおこなった。PfGCN5は、熱帯熱マラリア原虫のゲノムデータベース上に唯一annotateされ、現在までに組換え体での活性および原虫細胞での存在が確認されているヒストンアセチル基転移酵素である。ChIPによって得られたDNA画分を定量PCRによって解析した結果、PfGCN5はトロホゾイト期に特異的に1-Cys型Prx遺伝子の5'プロモーター上にリクルートされてくることが明らかとなった。これはマラリア原虫の遺伝子発現調節において、ヒストンアセチル基転移酵素の関与が具体的に示された最初の知見である。

In the past year, Prx gene expression regulation was aimed at: (1) cis-element in the 5'region of Prx gene expression;(2) Cys gene expression regulation;(3) Cys gene expression regulation;(4) Cys gene expression regulation;(5) Cys gene expression regulation; and (5) Cys gene expression regulation.(enhancer) and (trans-element) are associated with the alignment specific binding.(2) and (3) are associated with the alignment specific binding.(4) and (5) are associated with the alignment specific binding. This year, we confirmed the development-specific cis-element enhancer activity of 1-Cys-type Prx gene. The purpose of this study was to determine the 5'-position alignment and exchange of the 5'-position alignment of the 2-Cys-type Prx gene. As a result, the same row of Prx molecules (1-4 cycles) is used to increase the activity of Prx molecules. This is the first time that I've ever been able to report back to you. For example, the field of enhancement, trans-element, and combination are analyzed in detail. The results showed that all three binding sites were identical. Now, the information is transferred to the trans-element(complex), and the separation is refined. Epigenetic mechanisms are associated with the selection of groups, and candidates for factors associated with the selection of groups, such as PfGCN5, PfGCN5, PfGCN PfGCN5 is a unique annotate on the host cell, and now it has been confirmed that the host cell is active and that the host cell is active. ChIP detection results were analyzed by quantitative PCR, and PfGCN5-Cys-type Prx gene 5-Cys-type Prx gene 5 The relationship between gene expression regulation and gene transfer in protozoa was first reported.

项目成果

Expression of mRNAs and proteins for peroxiredoxins in Plasmodium falciparum erythrocytic stage

• DOI: 10.1016/j.parint.2004.08.005
• 发表时间: 2005-03-01
• 期刊: PARASITOLOGY INTERNATIONAL
• 影响因子: 1.9
• 作者: Yano, K;Komaki-Yasuda, K;Kawazu, S
• 通讯作者: Kawazu, S

Roles of 1-Cys peroxiredoxin in heam detoxification in the human malaria parasite Plasmodium falciparum.

1-Cys 过氧化还原蛋白在人类疟疾寄生虫恶性疟原虫血红解毒中的作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: FEBS Journal 272
• 作者: Kawazu;S. et al.
• 通讯作者: S. et al.

SURFIN is a polymorphic antigen expressed on Plasmodium falciparum merozoites and infected erythrocytes.

Surfin是一种在恶性疟原虫植物和感染的红细胞上表达的多态性抗原。

• DOI: 10.1084/jem.20041392
• 发表时间: 2005-06-06
• 期刊: JOURNAL OF EXPERIMENTAL MEDICINE
• 影响因子: 15.3
• 作者: Winter, G;Kawai, S;Haeggström, M;Kaneko, O;von Euler, A;Kawazu, SI;Palm, D;Fernandez, V;Wahlgren, M
• 通讯作者: Wahlgren, M

2-Cys peroxiredoxin TPx-1 is involved in gametocyte development in Plasmodium berghei

• DOI: 10.1016/j.molbiopara.2006.02.018
• 发表时间: 2006-07-01
• 期刊: MOLECULAR AND BIOCHEMICAL PARASITOLOGY
• 影响因子: 1.5
• 作者: Yano, Kazuhiko;Komaki-Yasuda, Kanako;Kawazu, Shin-ichiro
• 通讯作者: Kawazu, Shin-ichiro