Genetische und biochemische Analyse von Genprodukten des hrp-Genclusters von Xanthomonas campestris pv. vesicatoria

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Xanthomonas campestris pv. vesicatoria, der Erreger der bakteriellen Fleckenkrankheit in Paprika und Tomate, exprimiert ein von hrp Genen kodiertes Typ III-Proteinsekretionssystem. Das Typ III System ist zur erfolgreichen Infektion der Pflanze essentiell und transloziert vermutlich Proteine direkt in die Wirtszelle. Die Sequenzanalyse der 23-kb hrp Region hat ergeben, daß neun der mehr als 20 vorhergesagten Proteine konservierte Komponenten des Typ III-Systems darstellen. Hier sollen Gene des rechten Bereiches der hrp Region, deren Funktion unbekannt ist, genetisch und biochemisch untersucht werden. Nichtpolare Mutationen in jedem der Gene werden auf ihre Auswirkungen hinsichtlich der Interaktion mit suszeptiblen und resistenten Pflanzen sowie der Typ III Sekretion untersucht. Die Regulation der Expression soll mit Hilfe von Reportergenfusionen bestimmt werden. Zur Detektion und Lokalisierung werden die Proteine mit Epitop-Tags versehen. Darüberhinaus soll eine Überexpression und Reinigung der Proteine aus E. coli der Produktion von polyklonalen Antikörpern dienen, die zu Proteinlokalisierungs- und Interaktionsstudien eingesetzt werden.