性ホルモンの眼内における役割の解明

阐明性激素在眼睛中的作用

• 批准号: 13771029
• 负责人: 小林 かおり
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771029/
• 关键词: 毛様体; エストロゲンレセプター; 17β-HSD4型; 間接蛍光抗体法; RT-PCR; in situハイブリダイゼーション; 高度近視; 脈絡膜新生血管膜

本年度は昨年度より引き続き、間接蛍光抗体法にてエストロゲンレセプターとエストロゲン代謝酵素である17ベーターハイドロキシステロイドデハイドロゲナーゼ4型(17β-HSD4型)のタンパク質の発現について、毛様体における分布を検討した。さらにRT-PCR、in situハイブリダイゼーションにてmRNAの毛様体における発現、分布を検討した。1)ウシ、サルの摘出眼球より毛様体の凍結切片を作製し、4%パラホルムアルデヒド固定した。エストロゲンレセプターと17β-HSD4型の局在を検討するため、間接蛍光抗体法を施行し、共焦点顕微鏡を用いて観察した。ウシにおいて抗エストロゲンレセプター抗体による反応は、毛様体の扁平部には均一にみられたが、毛様体襞部の前部では、後部に比較して染色性が弱かった。17β-HSD4型は、毛様体上皮の部位による発現量の差はみられなかった。2)エストロゲンレセプターのmRNAの発現を検討するために、RT-PCRを施行した。サル毛様体よりRNAを抽出し、RT-PCRを行った。得られたPCR産物の塩基配列を決定した。サル毛様体におけるエストロゲンレセプターの発現が確認された。in situハイブリダイゼーションにて、エストロゲンレセプターと17β-HSD4型の局在を解析した。哺乳類の毛様体上皮に性ホルモン及び性ホルモン代謝酵素が存在することは、毛様体上皮における性ホルモンの役割を示唆した。

This year, compared with the previous year, the distribution of metabolic enzymes by indirect light antibody method was investigated. The distribution of metabolic enzymes by indirect light antibody method was investigated. In addition, RT-PCR, in situ hybridization and DNA sequencing were used to investigate the expression and distribution of mRNA in human hair. 1) The frozen sections of the removed eyeball and hair were prepared and 4% of the eyes were fixed. The 17β-HSD type 4 was investigated by indirect fluorescent antibody method and confocal microscopy. The anti-tumor antibody is composed of anti-tumor and anti-tumor antibodies. The anti-tumor antibody is composed of anti-tumor and anti-tumor antibodies. The anti-tumor antibody is composed of anti-tumor and anti-tumor antibodies. 17β-HSD4 type: The difference in the amount of light emitted from the epithelial parts of the hair and the hair is different. 2) The mRNA expression of the gene was studied by RT-PCR. RNA extraction and RT-PCR PCR products were obtained and gene alignment was determined. The appearance of the hair is confirmed. In situ analysis of 17β-HSD4 Mammalian hair epithelium sex and sex metabolic enzymes exist, and the hair epithelium sex and sex metabolic enzymes exist.

项目成果

K.Kobayashi, H.Kobayashi: "Detection of estrogen receptor by in situ hybridization"Methods Mol Biol.. 196. 79-84 (2002)

K.Kobayashi，H.Kobayashi：“通过原位杂交检测雌激素受体”Methods Mol Biol.. 196. 79-84 (2002)

Kaori Kobayashi: "Expression of Estrogen Receptor in the choroidal Neouascular Membranes in Highly myopic eyes"RETINA. (印刷中). (2002)

Kaori Kobayashi：“高度近视眼脉络膜新血管膜中雌激素受体的表达”（印刷中）。