アミロイド形成性ペプチドの細胞膜への作用に関する研究

淀粉样肽对细胞膜影响的研究

• 批准号: 13771362
• 负责人: 平倉 穣
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771362/
• 关键词: アミロイド; チャネル; カルシウム; 細胞毒性; イメージング; 脂質平面膜; リポソーム

アミロイド形成性ペプチドの細胞毒性の分子機構としては、細胞内カルシウム恒常性攪乱説及び活性酸素毒性説が有力であり、これまでに非常に多くの研究者がこれらの仮説を指示する実験結果を発表している。筆者は、アミロイド形成性ペプチド自らが細胞膜の脂質二重相に入り込んで毒性のカルシウム透過性ポアーを形成する可能性を人工膜系で示してしてきており、今回の研究ではこのことの生細胞系での妥当性を検証することを試みた。カルシウムイメージング法により、ペプチド添加に伴って細胞内にカルシウムが動員されるか否かを可視化したところ、カルシウム上昇がいくつかの細胞で観察された。主として用いたペプチドはアルツハイマーアミロイド25-35であり、従来、人工膜系では非常に再現性よく膜透過性を更新させることが知られているが、生細胞系ではこのような高い再現性は見られなかった。非常に興味深いことに、カルシウム上昇が見られた細胞では、一過的に急激なカルシウム上昇が見られた後、次第に減少に転じるということが観察された。人工膜系では、一度ポアーが形成されると非可逆的なイオン流が見られることを鑑みるとき、生細胞ではカルシウム汲み出し(ポンプ)機能や膜蛋白との相互作用、さらにはインタナリゼーションなどによってポアーそのものが除去されるというような防御機構が働いている可能性があろう。ポアー形成は確率過程であり、散発的に細胞膜に形成されて無差別的なイオン流を誘発するであろうから、アミロイドに暴露された細胞における代謝的負荷は長期間ではかなり大きなものになろう。今後はイメージング法で包括的なデータを集積すると共に、代謝負荷をより統計平均的に表す熱量測定を行うことが望ましい。実験結果の優先権の問題があり、また、より包括的な形で発表したいこともあって、今年度は学会発表を控えたため、当初予定した旅費を使用しなかった。

The molecular mechanism of cytotoxicity of the form factor and the intracellular mechanism of homeostasis and active acid toxicity are very powerful, and many researchers have been able to provide guidance for this study. The authors try to demonstrate the feasibility of the formation of a synthetic membrane system by examining the formation of a lipid duplex from a cell membrane, the toxicity of the lipid duplex, and the suitability of the biological cell line. In the case of cell culture, the cell culture can be visualized by adding a cell culture to the cell culture. The main purpose of this study is to improve the reproducibility of artificial membrane systems. In addition, it is necessary to increase the number of cells and increase the number of cells in order to reduce the number of cells. The artificial membrane system has been formed for a long time, and the irreversible flow has been observed. The biological cell has been formed to absorb the membrane protein interaction. The defense mechanism has been removed. The process of cell membrane formation and diffusion is accurate. The process of cell membrane formation and diffusion is indistinguishable. The process of cell membrane formation and diffusion is different. The process of cell membrane formation and diffusion is different. In the future, the method includes the measurement of total metabolic load and statistical average calorie. The results of the priority issue include the form of the report, the year of the report, and the cost of the report.

项目成果

Kagan, B.L.et al.: "The channel hypothesis of Alzheimer's disease"Peptide. (In press).

Kagan, B.L.等人：“阿尔茨海默病的通道假说”肽。

Kobayashi, S. et al.: "Bacteria-Selective Synergism between the Antimicrobial Peptides alpha-Helical Magainin 2 and Cyclic beta-Sheet Tachyplesin I : Toward Cocktail Therapy"Biochemistry. 40(48). 14330-14335 (2001)

Kobayashi, S. 等人：“抗菌肽 α-螺旋 Magainin 2 和环状 β-片 Tachyplesin I 之间的细菌选择性协同作用：走向鸡尾酒疗法”生物化学。

Hirakura, Y. et al.: "Pore Formation by β_2-Microglobulin : A Mechanism for the Pathogenesis of Dialysis Associated Amyloidsis"Amyloid : Int. J. Exp. Clin. Invest.. 8(2). 94-100 (2001)

Hirakura，Y. 等人：“β_2-微球蛋白的孔隙形成：透析相关淀粉样变性的发病机制”，《淀粉样蛋白》：Int. Invest. 8(2001)。

Satoh, Y. et al.: "β-Amyloid peptides inhibit acetylcholine release from cholinergic presynaptic nerve endings isolated from an electric ray"Neurosci. Lett.. 302(2-3). 97-100 (2001)

Satoh，Y.等人：“β-淀粉样肽抑制从电射线分离的胆碱能突触前神经末梢释放乙酰胆碱”N​​eurosci.302(2-3)(2001)。

Hirakura, Y. et al.: "Channel Formation by Serum Amyloid A : A Potential Mechanism for Amyloid Pathogenesis and Host Defense"Amyloid : J. Protein Folding Disord.. (In press).

Hirakura, Y. 等人：“血清淀粉样蛋白 A 的通道形成：淀粉样蛋白发病机制和宿主防御的潜在机制”淀粉样蛋白：J. 蛋白质折叠紊乱..（正在出版）。