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Physiological significance and structure of TRP channel/ANO1 complex, and its clinical application

TRP通道/ANO1复合物的生理意义、结构及其临床应用

基本信息

批准号：
21H02667
负责人：
富永真琴
金额：
$ 11.23万
依托单位：
National Institutes of Natural Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02667/
关键词：
TRPチャネル ANO1複合体カルシウム ANO1 複合体

项目摘要

TRPチャネルは高いCa2+透過性を有しているが、その生理的意義は十分には明らかでない。興奮性細胞では陽イオンの流入による脱分極が電位作動性Na+チャネルを活性化して活動電位が起こるが、非興奮性細胞ではCa2+流入による様々なCa2+依存性の細胞応答が起こるとされている。これまで、TRPV4チャネルとCa2+活性化Cl-チャネルanoctamin1 (ANO1)が形質膜で複合体を形成し、機能連関によって水流出をもたらすこと、さらにTRPV1, TRPA1/ANO1複合体が感覚神経で脱分極の促進から痛み増強をもたらすことを報告してきた。2022年度は、TRPV3とANO1の機能連関を解析した。ヒトケラチノサイトでTRPV3とANO1の遺伝子発現を確認し、Ca2+-imaging法でTRPV3の刺激剤であるcamphorで細胞内Ca2+濃度の増大を観察した。パッチクランプ法で、TRPV3とANO1を共発現させた細胞でのみ、camphor刺激によるCl-電流の活性化を観察した。ヒトケラチノサイトを用いたwound healing assayでは、細胞の増殖・移動がANO阻害剤、TRPV3阻害剤、Cl-低溶液で抑制された。ヒトケラチノサイトの細胞内Cl-濃度は低く、ANO1活性化でCl-流入が起こっていると結論した。このCl-流入がMAPKの活性制御を介して細胞周期を調整してヒトケラチノサイトの増殖を起こしていることが明らかになった。

TRP is highly Ca2 + permeable and has physiological significance. Excitatory cells are depolarized from Ca2 + influx to activated Na+ production, whereas non-excitatory cells are depolarized from Ca2 + influx to activated Ca2 + dependent cellular responses. TRPV4, TRPA1/ANO1 complex formed from Ca2 + activated Cl-activated plasma membrane, functional linkage, water efflux and enhancement of sensory depolarization. In 2022, TRPV3 and ANO1 were analyzed. TRPV3 and ANO1 gene expression was confirmed by fluorescence microscopy, and the increase of intracellular Ca2 + concentration was observed by Ca2 +-imaging. The activation of Cl-currents in cells stimulated by TCPV, TRPV3 and ANO1 was observed. Wound healing assay is used to inhibit cell proliferation and migration. ANO inhibitor, TRPV3 inhibitor, Cl-low solution inhibitor The intracellular Cl-concentration in the cells was low, and the Cl-influx from ANO1 activation was initiated. The regulation of MAPK activity by Cl-influx is mediated by cell cycle regulation.