ペプチドモデルを用いた構成的アプローチによるコラーゲンの3本らせん形成過程の解明

使用肽模型的本构方法阐明胶原蛋白三螺旋形成过程

• 批准号: 13780484
• 负责人: 小出 隆規
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780484/
• 关键词: ペプチド; コラーゲン; ビピリジン; 分子シャペロン; フォールディング

1.2,2'-bipyridine含有コラーゲンモデルによるコラーゲン3本らせん検出法の改良末端にbipyridyl基を有するコラーゲンモデルペプチドを、種々の遷移金属イオンの存在下において錯形成させ、その分光学的性質を検討した。その結果、従来用いていた二価鉄イオンがコラーゲンヘリックスの検出には最も適していることがわかった。また、bipyridyl基をコラーゲンモデルペプチド鎖の内部に組み込めるようにするため、アミノ基およびカルボキシル基両方を有するbipyridine誘導体を新規に合成した。2.HSP47およびプロリン4-水酸化酵素のシャペロン機能の解明プロコラーゲン特異的シャペロンHSP47が3本らせんを形成したX-Arg-Gly配列を特異的に認識するという知見に基づいて、種々のアルギニンおよびプロリン誘導体を含有するコラーゲンモデルペプチドを合成し、HSP47との相互作用を解析した。その結果、HSP47との結合には側鎖グアニジノ基が重要であることが明らかになった。また、構築した1本鎖型ペプチドライブラリーを用いた網羅的解析により、プロリン4-水酸化酵素タイプIとタイプIIの基質結合プロファイルがほぼ同じであることが明らかになった。この結果は、いずれのタイプのプロリン4-水酸化酵素も1本鎖のコラーゲンに結合する分子シャペロンとして機能していることを意味する。本研究から得られた知見は、小胞体内におけるプロコラーゲンのフォールディング過程で、プロリン4-水酸化酵素からHSP47へとプロコラーゲンが受け渡たされることを示唆している。

1.2,2'-bipyridine contains コラーゲンモデルによるコラーゲン3本らせん検出法のmodified terminal bipyridy lBasic base material, kind of migration metal material In the presence of ンの, the において error forms させ, and the spectroscopic properties of そのを検した.そのRESULT、従来用いていた二価鉄イオンがコラーゲンヘリックスの検出には最suitable していることがわかった.また、bipyridyl base をコラーゲンモデルペプチドLOCKの内に组み込めるようにするため, アミノbased およびカルボキシルシ両方を有するbipyridine inducer を新guiに synthesized した. 2. HSP47 HSP4-Water acidifying enzyme function explanation The unique シャペロンHSP47が3らせんをformationしたX-Arg-Gly arrayをSpecial knowledge of the knowledge of the knowledge of the base of knowledge, species of knowledge Contains HSP47 and HSP47 Interaction Analysis.そのRESULTS, HSP47との Combined には Side lock グアニジノbase がimportant であることが明らかになった.また、Construction した1 lock type ペプチドライブラリーを Analysis of いた snare により、プロリン4-water acid Chemical enzyme タイプIとタイプIIの matrix binding プロファイルがほぼ Same as じであることが明らかになった.このRESULTは、いずれのタイプのプロリン4-water acidifying enzyme も1本 lockのコラーゲンに合するmolecule シャペロンとしてfunction していることをmeans する. This research is based on the knowledge and insights gained in this study, and the process of the small cells within the body.リン4-Water Acidifying Enzyme HSP47 HSP47 HSP47 HSP47 HSP47 Water Acidifying Enzyme

项目成果

Takaki Koide: "Metal-assisted stabilization and probing of collagenous triple helices"Journal of the American Chemical Society. 124・32. 9388-9389 (2002)

Takaki Koide：“胶原三螺旋的金属辅助稳定和探测”美国化学会杂志 124・32（2002）。

Takaki Koide: "Fe^<II>(bipyridine)_3-complex : a novel tool for conformational studies of collagen"Peptide Science 2002. (印刷中). (2003)

Takaki Koide：“Fe^<II>(联吡啶)_3-复合物：胶原蛋白构象研究的新工具”Peptide Science 2002。（印刷中）。

Takaki Koide: "Xaa-Arg-Gly triplets in the collagen triple-helix are dominant binding sites for the molecular chaperone HSP47"Journal of Biological Chemistry. (印刷中). (2002)

Takaki Koide：“胶原蛋白三螺旋中的 Xaa-Arg-Gly 三联体是分子伴侣 HSP47 的主要结合位点”《生物化学杂志》（2002 年出版）。

Takaki Koide: "Peptide-binding profile of procollagen prolyl 4-hydroxylase"Peptide Science 2001. (印刷中). (2002)

Takaki Koide：“前胶原脯氨酰 4-羟化酶的肽结合特征”，肽科学 2001 年。（出版中）。