小脳形成に関わるチロシンリン酸化タンパク質群のプロテオーム解析

参与小脑形成的酪氨酸磷酸化蛋白的蛋白质组分析

• 批准号: 13780618
• 负责人: 田岡 万悟
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780618/
• 关键词: Mass spectrometry; Liquid chromatography

チロシンリン酸化タンパク質の小脳のステージごとの変化を解析するためには、同定される各タンパク質の定量的なデータを取得した後に、それらを網羅的に比較をする必要があると考えられた。そこで、チロシンリン酸化タンパク質(ペプチド)の同位体希釈法による定量解析について、モデルタンパク質を利用して評価検討した。モデルタンパク質はリジルエンドペプチダーゼで限定的に分解し、生じたペプチドのアミノ末端とリジンのアミノ基を、同位体標識した新規試薬で修飾した。修飾効率は、アミノ末端よりもリジンアミノ基の方が高く、アミノ末端はほとんど修飾されなかった。異なった同位体によって標識されたペプチドは混合後、LC-ESI/TOFMSで分析され、タンデムMS法によって同定された。同定されたペプチドの定量は、スペクトルから得られるそれぞれの同位体MSシグナルの強度比を比較することで行った。定量では2桁程度の直線性が見られ、半定量するにあたって、十分な直線性を持っていると考えられた。一方、チロシンリン酸化タンパク質を回収するための抗チロシンリン酸化抗体を利用した回収方法については検討中である。

The quality of the product is analyzed and compared. Isotope analysis method for quantitative analysis and evaluation of isotope quality The quality of the sample is limited to the decomposition of the sample, the production of the sample, the end of the sample, and the modification of the isotope. The modification rate is higher than that of the end. Different isoforms were identified by LC-ESI/TOFMS analysis and by MS method. The same determination of the number of samples, the number of samples obtained, and the number of samples obtained. Quantitative, semi-quantitative and very linear A method for detecting the presence of anti-HCV antibody in the serum of a patient with HIV infection is described.

项目成果

田岡 万悟: "細胞内機能性複合体解析のためのタンパク質大規模解析システム"実験医学. 20(1). 8-12 (2002)

Mango Taika：“用于分析细胞内功能复合物的大规模蛋白质分析系统”实验医学20(1)。