岩石中から分離した微生物の解析と利用

岩石中微生物的分析与利用

• 批准号: 13875159
• 负责人: 今中 忠行
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13875159/
• 关键词: 新規微生物; 界面活性剤; Bacillus; lipase; amylase; 岩石; バイオサーファクタント; サーファクチン

我々は、ある特殊な粘土質の岩石を排水貯留槽に静置させることにより、本来なら起こる油水分離、油画分の固化・高粘性化を防ぐことができ、BODも減少させる、という極めて興味深い現象を発見した。油成分が貯留槽の表面にこびり付くこともなく、槽内にはほとんど水と同程度の粘性をもつ均一な溶液が得られた。この岩石は一度加えるだけで、少なくとも2年間は同じ活性を示した。岩石中の微生物スクリーニングを行ったところ、形態的に異なる14種の微生物を分離することができた。それぞれについて、油分解酵素のlipase、esterase、他の加水分解酵素であるamylase、cellulase、proteaseの活性を調べた結果、R5株は上記5つの活性全てを示した。R5株は極めて増殖速度が速く、多種類のタンパク質を大量に分泌生産していることがわかった。また、強力なバイオサーファクタント(BS)、さらに抗生物質をも生産していることが判明した。本菌を同定した結果、R5株はBacillus属の一種であった。さらに我々は優れた特性や新規構造を有するBS生産菌を同定するため、様々な岩石サンプルを採取し、BS合成菌のスクリーニングを行った。一次スクリーニングでは溶菌作用とイオン性物質の電化中和による会合を指標にBS合成菌の同定を進めた。この結果、27種の候補微生物が単離された。各々について、16S rRNA遺伝子の増幅を行い塩基配列を決定した。二次スクリーニングでは栄養寒天培地上に原油を重層することによりBS活性を検出した。B2U-3菌体由来の界面活性成分の精製・構造決定を行った。B2U-3Bの構造は代表的なBSであるsurfactinの構造と類似していた。Surfactinのアミノ酸骨格はL-Glu-L-Leu-D-Leu-L-Val-L-Asp-D-Leu-L-Leuであり、B2U-3BではValからIleへの置換が起こっていた。

Special clayey rocks are allowed to stand in a drainage tank. Oil and water separation, solidification of oil painting components, prevention of high viscosity, reduction of BOD, and deep interest are observed. The oil composition is obtained by mixing the surface of the storage tank with water and by mixing the viscosity of the solution with water. The rock was once more active, less active for two years. 14 species of microorganisms were isolated from rocks with different morphology. The activity of lipase, esterase, other hydrolytic enzymes, amylase, cellulase and protease was regulated. The activity of R5 strain was fully demonstrated. R5 plants grow rapidly and produce a large number of different types of plants. The production of antibiotic substances in China has been identified by the Ministry of Health. The strain R5 is a species of Bacillus. The new structure of BS production bacteria has been developed. The new structure of BS production bacteria has been developed. The first step is to dissolve bacteria, to neutralize chemical substances, and to combine them with BS synthesis bacteria. As a result, 27 candidate microorganisms were isolated. The 16S rRNA gene was amplified and the nucleotide sequence was determined. The second time, the activity of BS was detected in the crude oil layer on the ground. Purification and structural determination of interfacial active components from B2U-3 cell origin B2U-3B structure is similar to BS structure. Surfactin

项目成果

N.Rashid, Y.Shimada, S.Ezaki, H.Atomi, T.Imanaka: "A low-temperature lipase from a psychrotrophic Pseudomonas sp. KB700A"Appl. Environ. Microbiol.. 67(9). 4064-4069 (2001)

N.Rashid、Y.Shimada、S.Ezaki、H.Atomi、T.Imanaka：“来自耐冷假单胞菌 KB700A 的低温脂肪酶”Appl。