エチレン受容体遺伝子の転写調節機構の解明

乙烯受体基因转录调控机制的阐明

基本信息

  • 批准号:
    02F00207
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

植物はエチレン生合成と感受性を調節して、エチレンの効果を調節している。従って、植物のエチレン生合成や感受性を解明し、それらが制御できれば諸形質の分子育種が可能になる。エチレン生合成は、先駆的研究によりその生合成経路や関連遺伝子が明らかになり、それらの遺伝子を使って生合成が制御できることも報告されている。一方、エチレン感受性は、シロイヌナズナ変異体を使った研究からエチレン受容体遺伝子と関連遺伝子が単離されている。本グループでは、メロンからエチレン受容体遺伝子(Cm-ERS1,Cm-ETR1)を単離した。解析の結果、これらの遺伝子がmRNA及びタンパク質レベルで発現制御を受けていること、その発現制御がエチレン感受性制御において重要な役割を果たしていることを示唆してきた。従って、エチレン受容体の発現調節機構を解明することが、エチレン感受性調節機構を解明する上で重要である。本年度は、前年度に引続いてCm-ERS1のプロモーター解析を行った。加えて、Cm-ETR1のプロモーターについてもシス領域の同定を試みた。以下の結果が得られた。1、Cm-ETR1のプロモーターの解析:中間報告の結果に従ってさらにCm-ERS1のプロモーター領域の-1500〜-1100、-1500〜-1000、-500〜-150と-400〜-150部分をPCRにより増幅し、それぞれにGUSもしくはGFP遺伝子に繋げて発現ベクターを構築した。これらをパーティクルガンによりタバコ或いはメロンの葉に打ち込み、プローモーター領域の活性を調べた。その結果、-1100〜-1000または-500〜-400間にシス領域があると考えられた。しかし、発現量の変化はコントロールに比べてわずかでシス領域による発現量の増加だと判断するには至らなかった。今後これらの領域とGUS遺伝子を植物に形質転換させ、安定した条件でさらに発現量の変化を検討するともにゲルモビリティーシフト法によるシス領域の絞り込みとone-hybrid法による転写調節因子の同定が必要である。2、Cm-ETR1プロモーターの解析:Cm-ERS1プロモーターと同様に欠失実験を行い、-300〜-260にシス領域があることが判明した。さらに、ゲルモビリティーシフト法を組み合わせた欠失実験により、シス領域を23塩基まで絞り込むことができた。データベース検索の結果、この領域には温度制御と光制御に関与するシス配列が存在した。ゲルモビリティーシフト法の結果、この領域に結合する2つの転写因子が発現しているこども明らかになった。現在、同定したシス領域をベイトにone-hybrid法による転写調節因子のスクリーニングを行っている。それにより、エチレン受容体遺伝子の転写調節因子が世界で初めて単離されるものと期待される。
Plant growth synthesis and sensitivity regulation, plant growth and fruit regulation The molecular breeding of plant growth, synthesis and susceptibility is possible. The study of biosynthetic pathway and related genes in the field of biosynthetic pathway and related genes is reported in this paper. A party, a party The receptor genes (Cm-ERS1,Cm-ETR1) are isolated from each other. The results of the analysis, the expression of mRNA and protein, the expression of protein and protein, the expression of protein and protein The development and regulation mechanism of the receptor is important. This year, compared with the previous year, the introduction of Cm-ERS1 was analyzed. Add, Cm-ETR1 The following results were obtained. 1. Analysis of Cm-ETR1 gene expression: The results of the intermediate report show that the PCR amplification of Cm-ERS1 gene expression domain-1500 ~-1100,-1500 ~-1000,-500 ~-150 and-400 ~-150 is increased, and the GFP gene expression is increased. The activity of the domain is regulated by the activity of the domain. The results are from-1100 to-1000 and from-500 to-400 in the market. For example, if you want to increase the amount of discovery, you can change the amount of discovery. In the future, it is necessary to determine the identity of regulatory factors in the field of GUS gene expression in plants under the condition of physical transformation and stability. 2. Analysis of Cm-ETR1: Cm-ERS 1: Cm-ETR 1: Cm-ETR: Cm-ETR 1: Cm-ETR 1: Cm-ETR: Cm-ETR 1: Cm-ETR: Cm-ETR 1: Cm-ETR 1: Cm-ETR In addition to the above, the company also has the ability to provide services to the public. The results of this research are related to temperature control, light control and system configuration. The result of the method, the domain, and the writing factor of the 2 are all present. Now, in the same field, the one-hybrid method is used to write the adjustment factor. The regulatory factors of receptor genes in the early stages of the world

项目成果

期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Cui ML, Ezura H, Nishimura S, Kamada H, Handa T: "A rapid Agrobacterium-mediated transformation of Antirrhinum majus L by using direct shoot regeneration from hypocotyl explants."Plant Science. 166(4). 873-879 (2004)
Cui ML、Ezura H、Nishimura S、Kamada H、Handa T:“通过利用下胚轴外植体的直接芽再生,进行农杆菌介导的金鱼草快速转化。”植物科学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Cui ML, Handa T, Ezura H: "An improved protocol for Agrobacterium-mediated transformation of Antirrhinum majus L"Molecular Genetics and Genomics. 270(4). 296-302 (2003)
Cui ML、Handa T、Ezura H:“农杆菌介导的金鱼草转化的改进方案”分子遗传学和基因组学。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Cui ML, Ezura H: "Agrobacterium-mediated transformation of Nemesia strumosa Benth, a model plant for asymmetric floral development."Plant Science. 165(4). 863-870 (2003)
Cui ML,Ezura H:“农杆菌介导的 Nemesia strumosa Benth 转化,一种不对称花卉发育的模型植物。”植物科学。
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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知道了